Внешний тюнинг: Внешний тюнинг автомобилей и мотоциклов в авто интернет-магазине

≡ «Неправильный» внешний тюнинг автомобиля • DRIVERU.RU / Пост

Тюнинг — такое модное, но зачастую, совершенно непонятное слово для некоторых автомобилистов. Так, обвешав свой автомобиль лампочками и оклеив наклейками сомнительного качества и содержания, они с гордо поднятой головой рассказывают друзьям о том, что «сделали своей ляльке легкий тюнинг». А ведь тюнинг — это не украшение своего авто, а его настройка, направленная на улучшение характеристик автомобиля. Да, есть такое понятие, как внешний тюнинг, но и его цель — улучшение. Попробую объяснить свою мысль на нескольких примерах.

Спойлер. Многие знают, что это такое, и для чего он служит. Спойлер на больших скоростях прижимает более легкую заднюю часть автомобиля к земле, что делает его более устойчивым на дороге. Поэтому, цепляя к своей машине «неправильный» спойлер, можно сделать ее менее устойчивой на дороге и, соответственно, опасной для вас и других участников движения.

Обвес (юбка, бампера). Назначение данных частей — улучшение аэродинамики автомобиля. Чем грозит автолюбителю «неправильный» бампер? Ухудшение аэродинамики, что влечет за собой повышенный расход топлива, неустойчивость на дороге. Не грамотно сделанный (хоть и красивый бампер) препятствует правильному охлаждению масла и жидкости в системе охлаждения авто, а также передних дисковых тормозов.

Воздухозаборник. Название говорит само за себя, его основная задача — обеспечение компрессора или турбины большим количеством воздуха. При установке «неправильного» (ложного) воздухозаборника автомобиль получает лишь дополнительное сопротивление воздуху, что опять же ухудшает его аэродинамику.

Люк. В случае отсутствия хорошего кондиционера или климат-контроля к этому предмету обращаются некоторые водители. Но дело в том, что люк тоже может быть «неправильным». Большая дырка, вырезанная в крыше автомобиля, нарушает целостность кузова, делая его менее жестким, а значит более опасным в случае аварии.

Вывод из всего вышесказанного: тюнинг должен делаться профессионалами, которые просчитают все плюсы и минусы. Да, это стоит намного дороже, но на безопасности экономить не стоит.

Красивый внешний тюнинг авто своими руками 🦈 avtoshark.com

Причина изменения стандартного вида – желание выделиться в потоке машин. Также красивый внешний тюнинг авто подчеркивает особенности и корректирует технические функции.

Автомобиль в своей конструкции сочетает необходимые элементы для безопасной эксплуатации. Придание машине индивидуальности называется внешним тюнингом автомобиля, или стайлингом. Есть много вариантов стайлинга, не запрещенных законом.

Автотюнинг – что это

Причина изменения стандартного вида – желание выделиться в потоке машин. Также красивый внешний тюнинг авто подчеркивает особенности и корректирует технические функции. Выбор внешности автомобиля зависит от желаний владельца и рамками установленных ограничений на изменение конструкции.

Не все работы по улучшению считаются тюнингом внешнего вида авто. Замена штатного оборудования на аналоги не относится к изменениям конструкции. Но некоторые доработки ухудшают безопасность автомобиля. Чаще внешний тюнинг машины применяется владельцем для создания комфорта и индивидуальности.

Детали конструкции автомобиля, чаще подвергающиеся изменениям:

• салон;
• ДВС;
• элементы кузова;
• аудиосистема;
• колеса.

Значительные доработки нужно согласовывать с ГИБДД. Тюнинг внешности авто, противоречащий законодательству, представляет опасность не только для хозяина транспорта, но и для других водителей.

Изменение внешнего вида кузова

Обновление дизайна авто – распространенный способ создания уникальности. Проводится доработка одной или нескольких частей.

Тюнинг ВАЗ 2114

Материалы и детали внешнего тюнинга авто:

• аэрография;
• лакокрасочное покрытие;
• пленка;
• хромированные поверхности;
• декоративная подсветка;
• резиновые накладки;
• вставки произвольной формы;
• дополнительные элементы кузова.

Применение внешнего тюнинга автомобиля не только улучшает вид, но и защищает кузов. Как пример – оклейка защитной антигравийной пленкой.

Пороги

Нижняя часть автомобильного кузова подвергается износу – воздействию воды, пыли и камней. Пороги получают сколы и вмятины в процессе эксплуатации автомобиля. Крепление этой детали кузова может быть съемным или частью рамы.

Способы изменения порогов машины:

• Установка специальных накладок. Распространенный материал для тюнинга – пенопласт. Для этого вырезается элемент, шпаклюется и окрашивается. Готовая тюнинговая деталь приклеивается на место.
• Установка дополнительных окрашенных или хромированных стальных порогов. Иногда пороги делают автоматическими выдвижными. Для внешнего тюнинга авто своими руками такими материалами потребуются навыки слесарных работ и сварки.
• Декорирование машины пластиковыми панелями. Заданной формы элементы вырезаются из заготовок и прикручиваются саморезами. Финишная отделка проводится стекловолокном и краской.

Внешний тюнинг машины делают самостоятельно или приобретают запчасти заводского изготовления.

Багажник

Владельцы автомобилей иногда стараются улучшить грузовой отсек. Способы тюнинга:

• Установка дополнительных внешних элементов – хром, декоративные накладки.
• Электропривод крышки багажника, установка красивых дизайнерских ручек.
• Использование грузового отсека для тюнинга аудиосистемы. Установка сабвуфера и усилителя.

Тюнинг ВАЗ 2110

Украшение поверхности багажника называется внешним тюнингом авто, в отличии изменения внутренности грузового отсека.

Фары

Приборы освещения помогают вести машину в темноте и предупреждают участников дорожного движения о маневре. Примеры рестайлинга автомобильных фар:

• Установка ксенона, светодиодного шнура – «ангельские глазки».
• Изменение цвета внутреннего отражателя, декоративные обводы фар.
• Наклейка прозрачной полиуретановой пленки. Эта деталь бронирует и надолго сохраняет поверхность фар.

Дополнительно установленное на автомобиль оборудование для освещения должно соответствовать законодательным нормам.

Обвес

Для создания спортивного вида машине необходимы детали, улучшающие аэродинамику. Для этого применяются обвесы разной формы и расположения.

Силовая модификация представлена «кенгурятниками», увеличенными порогами и лебедкой. Аэродинамический обвес предназначен для снижения сопротивления потоку воздуха и экономии топлива. Преобразование машины при помощи этой детали в подобие спорткара называется внешним тюнингом авто.

Спойлер и антикрыло

Правильно установленное антикрыло улучшает устойчивость машины на дороге. Автомобиль с таким дополнением выглядит спортивно и создает ощущение скорости.

Обвес на Лада 2112

Антикрыло изначально устанавливается на некоторые марки автомобилей, но при его отсутствии допускается брать «неродные» детали. Представленные на рынке спойлеры различаются стилем, формой и материалом. Перед покупкой измерьте крышку багажника и посоветуйтесь с механиком.

Защитная пленка

Один из наиболее распространенных видов тюнинга – дополнительное покрытие кузова автомобиля. Самоклеющаяся антигравийная пленка наносится на поверхность машины. Материал – полиуретан или винил толщиной от 0,1-0,3 мм.

Пленки для рестайлинга могут иметь текстуру, цвет и даже голографические рисунки. Стоимость полиуретанового покрытия значительно дороже винилового, но такая пленка более прочная и долговечная.

Оклеивают не обязательно всю машину. Иногда для экономии защищают только части, наиболее подверженные повреждениям.

Колпаки колес

Специальные накладки защищают диски автомобиля от грязи и повреждений. Стандартные пластмассовые колпаки выглядят обыденно. Стайлинг улучшит эту деталь автомобиля. Применяются цветная или прозрачная виниловая пленка, а также многослойная окраска для создания эффекта глубины.

Советы экспертов

Автотюнинг нужно хорошо продумать перед началом работы. Улучшение кузова называется тюнингом внешнего вида авто. Любая неуместная деталь может испортить вид машины.

Советы экспертов по рестайлингу:

• соблюдать требования законодательства насчет вмешательства в конструкцию автомобиля;
• учитывать мнение специалистов при установке конкретных деталей;
• использовать только соответствующие инструменты и качественные материалы;
• применять надежные способы крепления декора на машину.

Тюнинг лучше доверить специалистам, чтобы не испортить авто.

Внешний тюнинг УАЗ

Цена:
от: до:

Выберите категорию:
Все ТЮНИНГ УАЗ» Блокировки для УАЗ» Бодилифт» Внешний тюнинг» Диски колесные для УАЗ» Дисковые тормоза УАЗ» Комплектующие ВАКСОЙЛ» Лифт подвески УАЗ» Подвеска УАЗ» Полиуретановые проставки» Расширители колесных арок» Рулевое управление» Рулевые демпферы и стабилизаторы» Салон и кузов» Силовое оборудование для УАЗ: Бамперы/Багажники/Пороги/Фаркопы» Трансмиссия УАЗ» Шноркели для УАЗ» Электрооборудование ТЮНИНГ НИВЫ И ШЕВРОЛЕ НИВЫ ТЮНИНГ ГАЗ СОБОЛЬ 4Х4 АККУМУЛЯТОРЫ И АКСЕССУАРЫ БАГАЖНИКИ ЭКСПЕДИЦИОННЫЕ, ЛЕСТНИЦЫ, РЕЙЛИНГИ БАКИ ТОПЛИВНЫЕ БАМПЕРЫ СИЛОВЫЕ, ПОРОГИ И КОМПЛЕКТУЮЩИЕ СИЛОВОЕ ОБОРУДОВАНИЕ ARB БЛОКИРОВКИ БОДИЛИФТ (ЛИФТ КУЗОВА) БОКСЫ БАГАЖНЫЕ НА КРЫШУ ДИСКИ КОЛЕСНЫЕ И АКСЕССУАРЫ ДИСКОВЫЕ ТОРМОЗА ДОМКРАТЫ ЗАЩИТНЫЕ КЕЙСЫ ЗАЩИТА СИЛОВАЯ КАНИСТРЫ ЭКСПЕДИЦИОННЫЕ КОЛЕСНЫЕ МУФТЫ (ХАБЫ) КОМПРЕССОРЫ И ПНЕВМОСИСТЕМЫ КОНСОЛИ ПОТОЛОЧНЫЕ КУНГИ И АКСЕССУАРЫ ДЛЯ ПИКАПОВ ЛЕБЕДКИ И АКСЕССУАРЫ К НИМ ПОДВЕСКА, ЛИФТ-КОМПЛЕКТЫ ПРОСТАВКИ ДЛЯ УВЕЛИЧЕНИЯ КЛИРЕНСА РАСШИРИТЕЛИ КОЛЕСНЫХ АРОК РУЛЕВОЕ УПРАВЛЕНИЕ РУЛЕВЫЕ ДЕМПФЕРЫ И СТАБИЛИЗАТОРЫ СВЕТ ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЙ СИНТЕТИЧЕСКИЙ ТРОС СНЕГОУБОРОЧНЫЕ ОТВАЛЫ СТРОПЫ, ТРОСЫ СЭНД-ТРАКИ ТОВАРЫ ДЛЯ АВТОТУРИЗМА УНИВЕРСАЛЬНЫЕ КРЕПЛЕНИЯ ФАРКОПЫ и КОМПЛЕКТУЮЩИЕ ЦЕПИ ПРОТИВОСКОЛЬЖЕНИЯ ШИНЫ ДЛЯ ВНЕДОРОЖНИКОВ ШНОРКЕЛИ ШТУРМАНСКОЕ ОБОРУДОВАНИЕ ЭЛЕКТРООБОРУДОВАНИЕ ПОДАРОЧНЫЕ СЕРТИФИКАТЫ

Производитель:
Все4REVO4WD SYSTEMS4x4sportAfcarfiberAfcarfiber (Турция)ALPHA (Тайланд)Amada XtremeARBArgus AnalyzersAVMBerkutBFGoodrichBiltemaBlack RhinoBontyreBRCBUSHWACKER (США)CARRYBOYCHAMPIONChinaCM WinchCOME UPComforserCOOPERCORTLANDCSS (Турция)CSTDAKDarrDekaDelphiDelta(Германия)DuracellDynamica RopesEatonEGR (Австралия)End of The Road, Inc.EXIDEExpertDetalEXTANGFalconFARM JACKFatonFederalFlex LineGarminGOODYEARGT RadialHELLAHF DifferentialHi-liftIkon (Канада)INTERCOIRONMANJoker4x4K&KKAYMARKDT, РоссияKeko (Бразилия)KEMEIKing CobraKramcoKumhoKumho (Южная Корея)LAPTERLF WorksLightforceLinextras (Португалия)LOKKALongtengLS WheelsLUKMag LiteMarshalMaster-WinchMATECMaxlinerMAXTRAXMAXXISMechanix WearMetecMICKEY THOMPSONNankangNokian TyresOff-Road-WeelsOJ, РоссияOld Man EmuOPTIMAOptima BatteryORCIARIOTSOUTBACKPDWPirelliPitbul TiresPOWERFULProCompPROFORM (НОВАЯ ЗЕЛАНДИЯ)ProlightPT Group, ТольяттиQuattroRacing WheelsRALEX-TUNINGRanchoredBTRReplicaRivalROAD RANGER (Германия)Roll-N-Lock (США)RotopaxRuggedliner(США)RUNVARUSSACHSSAESAFARISAMMITR (Тайланд)SilverstoneSIMEXSJS (Тайланд)Sky-ComSM PowerSmittybiltSpringvar, Санкт-ПетербургStarcoSTARLEDSteelStaffSUPERSTONESuperwinchT-MAXTCC-tuningTecMateTELAWEITerratripTingerTopUp (Тайланд)TOPXENTorbikTough DogToyo (Япония)TplusTRIFFID TRUCKSTroffixTruXedoUFLEXUnielVAL-RACING, РоссияVFM-BosalVIAIRvnedorozhnik73.ruVoyagerWARNWelis LamontWincarX-Treme OutbackYokohamaYuBei Koyo Steering Systems Co.ZF, ГерманияАВС-ДизайнАВС-ДизайнАвтогур 73АвтоспасАвтоцепьАДСБАКОРБарнаул,РоссияБЗАКБлоккаБорисовВАКСОЙЛВолгаАвтоПромг. Курган, РоссияДАК, РоссияИЖ-ТЕХНО, РоссияИнсав, ТольяттиК&ККЗАТЭКиККРАМЗЛидерПлюсНИРФИ, РоссияНОМАКОННПК САМоВАРПолиуретан, РоссияПрофит+РИФРоссияРусская АртельСИБКОНТАКТСимбАТ, РоссияСОЮЗ-96СПРУТ, РоссияСтерлитамакСТОКРАТТайваньТайландТехно СфераТехноХимУльяновскШток Авто

Новинка:
Всенетда

Спецпредложение:
Всенетда

Результатов на странице:
5203550658095

Внешний тюнинг ВАЗ

Внешний тюнинг – это доработка внешности автомобиля, которая позволяет сделать любой автомобиль совершенно необычным и уникальным. Вы приобрели семейный автомобиль, но хотели бы внести в его внешность толику спортивности? А может быть, Вас не устраивает то, что вокруг по городу ездят точно такие же автомобили? Хочется сделать из собственного авто нечто особенное, но к серьезным капиталовложениям Вы пока не готовы? В таком случае, внешний тюнинг – как раз то, что Вам нужно!

Данный вид тюнинга очень популярен среди автолюбителей по всему миру и этому есть несколько причин.

Во-первых, большинство автовладельцев не стремится выжать из своего автомобиля максимум лошадиных сил и крутящего момента, их полностью удовлетворяют технические характеристики их «питомца» и все чего они хотят – придать ему чуточку индивидуальности, выделить его на дороге.

Во-вторых, это самая доступная (с точки зрения финансовых затрат) форма тюнинга, позволяющая быстро и относительно недорого достичь желаемого результата.

В-третьих, это наиболее заметная и эффектная форма тюнинга.

Итак, что же включает в себя внешний тюнинг? К его основым элементам относятся:

1. Установка нестандартных бамперов и порогов на автомобиль. Надо сказать, что этого вполне достаточно для того, чтобы освежить внешность автомобиля. В зависимости от дизайна бамперов, ваш автомобиль станет выглядеть солиднее, спортивнее либо даже агрессивнее. Лучше всего устанавливать сразу весь комплект «по кругу» кузова — бампер спереди, пороги по бокам и бампер сзади. Автомобиль с установленным спереди нестандартным бампером, каким бы стильным и красивым тот не был, будет выглядеть незаконченно и дисгармонично, если задний бампер останется прежним и не будут установлены пороги. Нестандартные бамперы, кроме того, позволяют улучшить аэродинамику автомобиля (за счет развитых воздухозаборников, спойлеров, своей особой формы) и могут быть полезными на практике – улучшать вентиляцию тормозных дисков, геометрию кузова и др.

2. Установка дополнительных спойлеров и воздухозаборников. Под «спойлером» обычно понимают небольшие пластиковые конструкции, устанавливаемые на кромку крышки багажника седанов. Однако, это не совсем верно. К спойлерам относятся также накладки на передний бампер и крышу. Функция спойлера в идеале – улучшать аэродинамику автомобиля, рассекать воздушные потоки (передний спойлер) либо создавать дополнительную прижимную силу (задний спойлер). Естественно, что функционально полезным на практике может быть лишь спойлер, разработанный в заводских (или близких к ним) условиях, потому как аэродинамические эксперименты – вещь дорогостоящая. Поэтому недорогие спойлеры чаще всего способны лишь видоизменить внешность автомобиля, тогда как с точки зрения аэродинамики они могут быть совершенно бесполезны.

3. Замена заводской оптики. Очень распространенный и достаточно эффективный способ изменить внешность собственного автомобиля. Сейчас на рынке представлено множество самых разных с точки зрения дизайна вариантов альтернативной светотехники для любого автомобиля. Поэтому без труда и относительно недорого (альтернативная оптика зачастую дешевле оригинальной) можно преобразить внешний вид своего авто, сделать его более стильным и визуально более современным.

4. Установка нестандартных кузовных панелей. Сюда относится монтаж нестандартных крыльев, капотов или других частей кузова. Одним из примеров подобного тюнинга может служить установка карбонового капота, который гораздо легче обычного металлического (что актуально при тюнинге спортивных автомобилей, где вес деталей имеет важное значение). Кроме того, возможна установка крыльев с расширенными колесными арками (для улучшения аэродинамики и установки колес большого диаметра), капотов из стекловолокна нестандартного дизайна с дополнительными воздухозаборниками и др.

5. Аэрография. Нанесение рисунка на кузов автомобиля с помощью аэрографа. Позволяет превратить ваш автомобиль в настоящее произведение искусства, сделать его неповторимым и по-настоящему эксклюзивным. Это очень дорогой вид тюнинга, однако по эффектности ему нет равных.

6. Установка дополнительных оптических элементов. Сюда относятся неоновые и светодиодные лампы, которые устанавливаются с целью подсветки днища автомобиля, колес или других частей автомобиля.

Все вышеперечисленные элементы внешнего тюнинга можно использовать отдельно, либо комбинировать друг с другом. Главное – знать меру, ведь количество элементов тюнинга не обязательно переходит в качество. И даже немалые капиталовложения во внешний тюнинг не всегда гарантируют достижение желаемого эффекта. Внешний тюнинг – это выбор тех, кто не желает мириться с тем, что его автомобиль похож на тысячи таких же. Тех, для кого стиль и индивидуальность имеют первостепенное значение. Тех, кто не хочет быть таким как все. Одним словом – это выбор индивидуалистов.

Прокачиваем авто – внешний тюнинг

Небольшой рассказ о видах и стилях современного тюнинга автомобилей.Автомобильный тюнинг популярен во всем мире. Независимо от того, выполняется ли модификация внешнего вида, производительности или того и другого. Этот список ни в коем случае не полон, но он дает краткое описание самых популярных стилей.

Что такое тюнинг автомобиля?
Это модификация или изменение транспортного средства для улучшения внешнего вида или характеристик конкретного транспортного средства.

Тюнинг внешнего вида авто может включать установку агрессивного обвеса для улучшения аэродинамики или для акцентирования внимания на определенной части транспортного средства. Внешний тюнинг преследует как эстетическую цель, так и улучшение аэродинамических характеристик.

Существует множество стилей внешнего тюнинга, но приведенные ниже выдержали испытание временем и считаются основными. В разных странах стили тюнинга пользуются разной популярностью.

The Rat Rod

Это один из самых простых стилей для распознавания. Происхождение этого стиля восходит к 1940-м годам и вплоть до 60-х годов. The Rat Rod — это транспортное средство, которое настроено на большую мощность, но внешний облик этого стиля тоже легко узнаваем. The Rat Rod часто напоминает изображение незавершенного проекта. Двигатель часто подвергается усовершенствованию, и различные части автомобиля могут выглядеть так, как будто они взяты от различных других транспортных средств. The Rat Rod — это Франкенштейн автомобильного мира. Причина, по которой этот стиль часто кажется незаконченным, заключается в том, что все элементы, которые были сочтены ненужными, были удалены. Эти части часто добавляют дополнительный вес или непривлекательны.Крылья, капоты и бамперы могут быть удалены, чтобы поддержать этот стиль. Подвеска этого транспортного средства может быть понижена для агрессивной позиции, и двигатель увеличен, чтобы произвести максимальную мощность.

Stance

Обычно в этом виде «проэктов» используют автомобили европейского производства, таких как Audi, Porsche, BMW и т.д. Для окраски обычно используется один определенный цвет по всему кузову автомобиля. Транспортное средство с заниженной подвеской, и максимально широкими колесами. По сути, автомобиль должен проецировать образ хищного, быстрого и роскошного внешнего вида. Шины могут быть меньше, но большинство из них будут большими спортивными шинами, которые предназначены для лучшего сцепления с дорогой.

The Low-rider

Это транспортное средство производит впечатление агрессивного внешнего вида из-за того, как низко автомобиль находится над дорогой. Внешний вид изыскан и включает в себя роскошные колеса, отличную покраску с графическим дизайном или без него и индивидуальный интерьер, который более роскошен, чем практичен. Переделка в лоурайдера может быть достигнуто путем установки гидравлической подвески и замены больших шин на меньшие. Подобная настройка транспортных средств повлияет на сцепление с дорогой и изменит аэродинамические свойства автомобиля. Этот тюнинг часто выполняется только для внешнего вида, а не для повышения производительности.

The Hot Rod

Базовыми транспортными средствами для этого конкретного стиля могут быть старые и классические автомобили, которые часто посещали улицы в 1930-х и 1940-х годах. Стиль Rat rod и стиль Hot rod могут показаться похожими, но они отличаются тем, что Hot rod часто используют автомобили более старого стиля. Они могут быть не так сильно изменены, как другие стили, но на самом деле, этот стиль немного сложнее.

Show Cars or Trailer Queens

Эти автомобили часто подобраны как антиквариат и восстановлены до полной оригинальности. Часто эти автомобили машиной на каждый день, вместо этого они стоят в гараже и выезжают только на выставки.Цель этих автомобилей — привлечь как можно больше внимания в автосалоне. Эти автомобили могут даже быть запрещены к эксплуатации на дорогах общего пользования.

JDM

Этот термин часто используется для описания специфического японского тюнинга. Автомобили Nissan являются очень популярной основой для этого стиля тюнинга. Стиль JDM заключается в создании авто с исключительными характеристиками, это быстрые и мощные машины, часто хетчбеки, которые на гоночной трассе превосходят автомобили более высоких классов. Стиль узнаваем внешне низкой посадкой, массивными обвесами, раскраской с азиатскими мотивами, и к тому же он достаточно популярен в России.

Сегодня тюнинг – это доступный каждому инструмент придания изюминки вашему любимому автомобилю. Огромный выбор запчастей для внешнего тюнинга любого стиля доступен в нашем каталоге.

Внешний тюнинг автомобиля и его главные составляющие элементы

Главная Обзоры авто

Тюнинг может быть внутренним, внешним и техническим. При этом, внутренний тюнинг, заключающийся в улучшении внутренних составляющих деталей автомобиля или их замене, менее распространен среди автомобилистов. Улучшения обычно заканчиваются на улучшении звука авто, и возможно, покупкой авточехлов.

Внешний и технический тюнинг более распространен. Внешний тюнинг заключается в отделке кузова автомобиля. Технический — в изменении «внутренних органов» автомобиля.

Внешний тюнинг позволяет одним махом сделать две вещи: улучшить аэродинамику автомобиля и его внешний вид.

Элементами внешнего тюнинга автомобиля можно считать свет автомобиля, обвесы, пороги, накладки, спойлеры, диски на колеса, колпаки, рейлинги, дефлекторы на окна, на крышу, на заднее стекло, на капот. Некоторые из действительно позволяют улучшить аэродинамику автомобиля. Это в первую очередь касается дефлекторов капота и окон.

Вообще название дефлекторы происходит из латинского слова «deflecto», означающее «отклонять что-либо». То есть дефлекторы для автомобиля осуществляют контроль над воздушными потоками, огибающими кузов автомобиля, отклоняют их, тем самым способствуя комфортному движению и защите стекол автомобиля.

Функционально дефлекторы бывают оконными, устанавливаемыми на капот, крышу. Последние также носят название мухобойка, или попросту муха.

Дефлектор капота защищает его и лобовое стекло от попадания на них насекомых, камешек, мелкого мусора. Подобрать ее можно на top-avto.com.ua. Особенно мухобойка на капот востребована при быстрой езде.

Дефлекторы окон, известные также, как ветровики, устанавливаются на дверную рамку над стеклом и способствуют циркуляции воздуха внутри автомобиля при открытых окнах. При закрытых же — закрывают их, тем самым защищая от оседания пыли и грязи. Ветровики, весьма полезны при слегка приоткрытом оке. С ними, внутрь автомобиля не попадут осадки и пыль. Выбирать ветровики нужно очень внимательно. В противном случае они могут повредить свеклоподъемник (если они вставные). На сайте Топ-Авто можно подобрать ветровики, подходящие под свою модель авто.

Также существуют задние дефлекторы. Они крепятся над задним стеклом и уменьшают его загрязняемость. Такие элементы часто можно встретить на автомобилях с типом кузова универсал или хетчбэк.

Дефлекторы на крышу можно встретить на автомобилях реже всего. Они способствуют более комфортной поездке с открытым люком.

Похожие новости

Внешний тюнинг — услуги компании «Полезный тюнинг»

Наша компания предлагает большой выбор запчастей для внешнего тюнинга вашего автомобиля. Поставляем современные высококачественные изделия для усовершенствования и улучшения облика вашей машины. Заказы отправляем по всей России, профессионально подбираем продукцию и консультируем клиентов.

Детали для иномарок и российских авто в наличии

В каталоге представлены аксессуары для тюнинга кузова и других внешних частей автомобилей. Вы найдете необходимые элементы для любой модели.

Всегда в наличии на нашем складе:  

• Обвесы;
• Пороги;
• Накладки, трубы бампера, на борта для пикапов, на пороги;
• Юбки на бампер;
• Расширители арок;
• Жабо цельное;
• Спойлеры;
• Диффузоры и защита заднего бампера;
• Решетки радиатора;
• Реснички;
• Универсальные сетки защиты радиатора;
• Молдинги;
• Дефлекторы;
• Брызговики.

Все изделия поставляются напрямую от производителей, изготавливаются из прочного АБС пластика или металла (из нержавеющей стали), проходят контроль и проверки качества, полностью соответствуют стандартам.

Вы можете купить запчасти для внешнего тюнинга в Белгороде по выгодным ценам с доставкой по России в интернет-магазине «Полезный тюнинг» для создания лучшего облика вашего авто или улучшения свойств аэродинамики.  Наши специалисты помогут с выбором товаров, если вы не нашли на сайте нужного элемента.

Широкий ассортимент автоаксессуаров в нашем интернет-магазине

Мы являемся официальным дилером завода «Русская Артель», партнерами брендов Alfeco, TCC, Russtal. Сотрудничество с проверенными поставщиками товаров позволяет нам обеспечивать клиентов необходимыми изделиями по разумным ценам.

В нашей товарной базе десятки вариантов аксессуаров для капота, оптики, дверей и салона. Чтобы купить продукцию, позвоните нам по телефону: +7 (904) 090-14-44 или оставьте заявку на странице нашего магазина. Наши менеджеры самостоятельно с вами свяжутся для уточнения параметров заказа.

Кривые внешней и внутренней настройки. Кривые настройки характеризуют нейронные …

Контекст 1

… группы — наборы ячеек, в которых активность распространяется благодаря точным временным соотношениям всплесков, — могут служить строительными блоками для когнитивных операций, таких как рабочая память [68], и демонстрируют зависимый от активности рост и распад, полезные для обучения и распознавания образов [69]. Опытным путем Havenith et al. [7] показали, что относительное время спайков в зрительной коре отражает такие свойства, как ориентация стимула.Важно отметить, что с учетом взаимосвязанных пулов нейронов синхронное распространение активности более стабильно, чем асинхронное. Фактически, распространение цепочек синфайров обеспечивает стабильную и надежную точность пиков в миллисекундном диапазоне, что поддерживает самостабилизацию активности цепей синфайров [70]. То есть, при правильных начальных условиях, изначально слабые цепочки Synfire (с небольшим количеством активных участников или плохой синхронизацией) могут привлекать дополнительных участников и уменьшать дисперсию синхронизации всплесков в группе.Однако немного разные начальные условия могут заставить цепочку синхронных воспламенений пересекать сепаратрису динамических систем между аттракторами, заставляя цепочку синхронных воспламенений быстро распадаться [71]. Поскольку сопоставления фаза-частота могут влиять на синхронизацию всплесков, сильные сопоставления фаза-скорость могут увеличить вероятность возникновения одних цепочек синхронного воспламенения, делая другие менее вероятными. Поскольку бета-амплитуда, по-видимому, действует как механизм управления усилением для силы преобразования фазы в частоту, влияние бета-сигнала на вероятность различных последовательностей всплесков можно регулировать, изменяя мощность бета-излучения.Однако на рисунке 6 показано, что фиксированное изменение амплитуды бета-сигнала будет иметь дифференциальный ответ на разных клетках, причем некоторые из них сильно увеличивают свое предпочтение фазы, в то время как другие показывают только умеренные изменения. Таким образом, отображение бета-амплитуды в вероятности последовательности спайков не является простым, но зависит от разнообразия параметров CLC, которые сохраняются в популяции. Наконец, зависимое от задачи переназначение предпочтительной фазы (см. Рисунки 5I, J) обеспечивает механизм для селективного и зависимого от задачи управления активацией и распространением цепочки синхронных воспламенений.То есть во время данной задачи относительные вероятности набора (зависящих от функции) последовательностей множественных нейронов спайков могут контролироваться посредством корректировки бета-амплитуды, в то время как переключение на другую задачу включает переназначение параметров CLC для вызова другого набор последовательностей всплесков в действие. Поскольку моторная кортикальная функция включает как модуляцию скорости, так и синхронизацию спайков [72,73], механизм избирательного управления синхронизацией, оставляя модуляцию скорости неизменной, может оказаться полезным для системы, управляющей распределенными сетями.В то время как отображение амплитуды и фазы в частоту кажется наиболее подходящим для локальных вычислений в данной области коры головного мозга, отображение разности фаз в скорость может играть роль в регулировании связи на больших расстояниях между областями. Согласно гипотезе связи через когерентность (CTC), эффективное усиление между взаимодействующими областями является функцией разности фаз между ними [21,51,74]. Трудно представить, как мозг может реализовать системы управления CTC без использования нейронов, которые обнаруживают разность фаз между областями, с одной стороны, а также нейронов, которые могут вызывать сдвиги в относительной фазе между дистальными областями, с другой.Нейроны, которые могут служить детекторами и эффекторами разности фаз, по-видимому, являются фундаментальными элементами, необходимыми для любой распределенной системы управления колебательной сетью. Более того, иерархические модели прогнозирующего кодирования предполагают, что гамма-ритм указывает на восходящую обработку с прямой связью, в то время как альфа- и бета-ритмы служат сигнатурами влияния нисходящей обратной связи [75–78]. Четкие отображения разности фаз в скорость, которые работают на этих частотах, по-видимому, являются одним из способов управления относительным балансом обработки с прямой связью и обратной связью.Отношение разности фаз к соотношению амплитуды огибающей и корреляции, показанное на рисунке S8D, по-видимому, поддерживает связь через гипотезу когерентности, но необходимы дальнейшие исследования, нацеленные на роль импульсных нейронов в дальнодействующих взаимодействиях, чтобы прояснить их роль в осцилляторном контроле распределенных сети. Предыдущие работы по изучению нейронной динамики в моторной коре имели тенденцию фокусироваться на корреляции между пиковой активностью и «внешними» факторами (например, скоростью движения, состоянием окружающей среды, сенсорной обратной связью, зависящей от поведения и т. Д.).Напротив, в этом исследовании основное внимание уделялось «внутренним» факторам, возникающим в результате спонтанной, продолжающейся активности мозга, включая амплитуду и фазу бета-излучения в пределах одной области или разницу в фазе бета-излучения между областями. В частности, мы показали, что большинство нейронов демонстрируют сигмовидную зависимость от амплитуды бета (рассматривается отдельно; рисунок 4), косинусную зависимость от фазы бета (рассматривается отдельно; рисунок 5), и что амплитуда бета обеспечивает квадратичный контроль усиления для предпочтения фазы бета. (Рисунок 6). Какова связь между этими «внешними» и «внутренними» факторами? На рисунке 3 представлен пример внешней и внутренней настройки одного примерного нейрона, показывающий, как входные переменные могут быть сопоставлены с прогнозируемой скоростью, которую затем можно сравнить с измеренной скоростью.Например, на рисунке 3D показано, как время испытания и идентификатор цели могут быть сопоставлены с прогнозируемой скоростью (цветом), а на рисунке 3E показано, как эта прогнозируемая частота сравнивается с реальной скоростью. Точно так же на рис. 3I – J это показано для амплитуды и фазы бета-излучения; Эти рисунки показывают, что диапазон прогнозируемой частоты, сгенерированный на основе отображения бета-частоты (r внутреннее), составляет примерно половину диапазона прогнозируемой частоты, сгенерированного на основе информации об испытаниях (r внешний). Сумма этих членов (r = r external + r internal) часто имеет больший диапазон, чем r external или r internal отдельно.Однако эта сумма предполагает, что r external и r internal независимы — предположение, которое не подходит для многих нейронов. Например, в то время как на рис. 7G – H показаны нейроны, в которых направление цели кажется независимым от глубины модуляции между фазой и скоростью, на рис. 7E – F показаны примеры явного взаимодействия между внутренними и внешними факторами. В центре внимания этого исследования было изучить зависимость пиков от внутренних факторов и определить, меняется ли эта зависимость от одной задачи к другой.Определение взаимосвязи между внутренними и внешними факторами потребует дальнейшего исследования. Тем не менее, большинство нейронов демонстрируют зависимость от «внутренних» бета-факторов, которая не опосредована внешними факторами, такими как настройка направления (Рисунок S3). Связанная с этим проблема заключается в том, что наблюдаемые изменения в CLC более напрямую связаны с восходящими требованиями, связанными с пробными подэтапами (например, удержание в сравнении с периодом перемещения), чем с модуляцией сверху вниз, связанной с контекстом задачи. На рисунке S5 эта проблема решается путем прямого сравнения эндогенных и экзогенных факторов; Тот факт, что различия между задачами, внутри стадии больше, чем внутри задачи, межэтапные различия, указывает на то, что контекст задачи является фактором в определении нейронных ответов, связанных с CLC.То есть, похоже, что на клетки влияют как восходящие экзогенные входные данные, связанные с требованиями обработки различных подэтапов испытаний, так и нисходящие эндогенные входные данные, связанные с поддержанием контекста задачи и выбором правил. Интересным аспектом этого анализа было наблюдение сильной неоднородности чувствительности нейронов к различным типам входных данных с учетом внешних и внутренних факторов или нисходящих и восходящих аспектов экспериментальных требований по сравнению со стабильностью экспериментальных требований. средние ответы населения.Например, на рис. S3A показаны базовые уровни активации для каждого нейрона во время BC и MC, и проясняется, что многие нейроны демонстрируют большие зависящие от задачи сдвиги в базовой скорости всплеска. Однако средняя частота всплесков среди населения относительно не изменилась (красные и синие линии, рисунок S3A). То есть, при изменении задачи нейронный ансамбль, кажется, переназначает частоту возбуждения около постоянной средней скорости популяции. Точно так же сопоставления амплитуды и скорости и фаза-скорость, вычисленные с использованием пиков от всех нейронов (сопоставления средней популяции), не показывают сильных зависимых от задачи сдвигов, наблюдаемых в сопоставлениях отдельных нейронов.Следовательно, мы могли бы предсказать, что электрофизиологические показатели, которые зависят от средней активности ансамбля, такие как связь между бета и широкополосным сигналом ЭКоГ [79], с меньшей вероятностью будут демонстрировать сильные зависимые от задачи изменения, чем отдельные нейроны. Наконец, эмпирические данные, представленные здесь, согласуются с гипотезой о том, что динамические изменения во взаимосвязи между множеством пространственных и временных масштабов обеспечивают простой механизм смещения функциональной сетевой активности [80]. В частности, связь между отдельными нейронами и моторным бета-ритмом проявляет несколько свойств, которые, по-видимому, могут влиять на локальные корковые вычисления, а именно фазовое регулирование относительного времени спайков в масштабе десятков миллисекунд и регулирование амплитуды победителя. — вся динамика в ансамблях нейронов, происходящая в масштабе сотен миллисекунд.Точно так же связь на большие расстояния, по-видимому, модулируется относительной разностью фаз между областями. Присутствие нейронов, чувствительных к этим свойствам, могло бы обеспечить механистический путь для этой информации об относительных фазовых различиях, которая должна быть обнаружена и активно использоваться в динамическом регулировании крупномасштабной сетевой активности. В то время как будущие исследования с использованием случайного вмешательства потребуются для полной проверки функциональной роли различных колебательных ритмов, здесь мы показали, что отображение бета-активности в скорость стрельбы изменяется обратимым, зависимым от задачи образом.Учитывая, что бета-колебания генерируются скоординированной популяционной активностью сотен тысяч клеток, вовлеченных в распределенную сеть, охватывающую оба полушария [11], результаты, представленные здесь …

Context 2

… определяют амплитуду -взвешенное отображение, которое описывает эффект мультипликативного усиления бета-амплитуды на преобразование фазы в частоту, была выполнена процедура, аналогичная описанной выше, но с сортировкой точек данных совместно по амплитуде и фазе.То есть сначала временной ряд амплитуды x A, временной ряд фазы x P и временной ряд всплеска x S были объединены в матрицу W = [x A x P x S], так что каждая строка представляет амплитуду, фазу , и пиковый статус одной точки выборки. Во-вторых, строки W были отсортированы в соответствии со значениями в столбце амплитуды и разделены на n интервалов ab (амплитуды), где каждый интервал имеет одинаковое количество точек выборки. В-третьих, данные в каждом (амплитудном) интервале были дополнительно отсортированы в n pb (фазовых) интервалов.В-четвертых, была вычислена частота выбросов для каждого интервала (амплитуда, фаза), сгенерировав матрицу частот выбросов n ab 6 n pb. В-пятых, эта матрица использовалась для ограничения аппроксимации 7-параметрической функции, описывающей полное отображение бета-скорости: FB (a, h) = R BETA (a, h) = p 1 + p 2 tanh ((a 2 p 3) / (2 p 4)) + (p 5 a + p 6 a 2) cos (h 2 p 7). Учитывая преобразование амплитуды в скорость R AMP (a) и преобразование фазы в скорость R PHASE (h), описанное выше, квадратичный весовой коэффициент или преобразование амплитуды в скорость w AMP (a) = b 1 a + b 2 a 2 можно извлечь из соотношения R (a, h) = R (a) + w (a) R (h).Описанный выше подход к моделированию по своей сути является одномерным, и его нелегко распространить на многомерные подходы. Для многомерного анализа мы использовали процедуру, аналогичную описанной в [41], но адаптированную для учета как амплитуд, так и фаз. Во-первых, N-канальные LFP-сигналы из набора обучающих данных были отфильтрованы, чтобы сгенерировать N-канальную комплексную матрицу из 6 N выборок, где для каждой записи абсолютное значение дает бета-амплитуду, а аргумент дает бета-фазу. Во-вторых, эта матрица использовалась для подбора параметров, описывающих комплексное многомерное распределение Гаусса [65]: p (x) = b exp [2 1/2 (x B 2 m B) HRB 2 1 (x B 2 m B)] , где x — вектор комплексных значений N каналов 6 1, x B = [x; conc (x)] — вектор комплексных значений 2N канала 6 1 (расширенный), m B — вектор комплексных значений 2N канала 6 1, представляющий среднее значение x B, RB — ковариация 2N канала 6 2N канала (расширенная) матрица x B, b = 1 / (p N sqrt (det (RB))) — термин нормализации, конъюгат (x) возвращает комплексное сопряжение x, а верхний индекс H представляет операцию сопряженного транспонирования.Назовите это распределение, подогнанное с использованием всех данных, базовым распределением p BASE (x). В-третьих, выполните еще одну подгонку распределения, используя данные LFP только по временам всплесков; назовем это распределением p ST (x), инициированным всплесками. В-четвертых, из нового набора обучающих данных отфильтрованных сигналов LFP извлеките вектор N каналов 61, представляющий каждую точку выборки, и вычислите отношение логарифма правдоподобия L (x) = log [p ST (x) / p BASE (x)], создание временного ряда из 1 6 N выборок значений логарифмического отношения правдоподобия. Назовите этот временной ряд L.В-пятых, вычислите отображение L-скорости для этого обучающего набора данных, как было описано выше для сопоставления амплитуды-скорости. В-шестых, найдите наилучшую 4-параметрическую сигмовидную диаграмму F S (L | p) для отображения L-to-rate, где p — это вектор параметров 4 6 1 (см. Определение сигмоидной функции выше). В-седьмых, учитывая новый набор тестовых данных отфильтрованных сигналов LFP, извлеките вектор N каналов 61, представляющий каждую точку выборки, и вычислите прогнозируемую оценку мгновенной скорости всплесков R EST (x) = FS [log [p ST (x) / p BASE ( Икс)]].В-восьмых, оцените прогноз, вычислив отображение оценочной скорости в измеренную скорость, вычисленное так же, как это было сделано для оценки отображения амплитуды в скорость. Прежде чем исследовать совместное влияние амплитуды и фазы бета-сигнала на нейронные нейроны, мы сначала рассматриваем отображение только бета-амплитуды в частоту всплесков (отображение амплитуды в частоту), затем только из бета-фазы в частоту всплесков (преобразование фазы в частоту). всплеск. Как амплитуда-частота, так и фаза-частота отображений демонстрируют зависимые от задачи изменения, как и полное отображение бета-частоты, и мы характеризуем распределение параметров отображения по населению.Затем мы рассматриваем зависимость между выбросами и разностью фаз бета между левой и правой первичной моторной корой; тогда как амплитуда и фаза предоставляют информацию об одной области, разность фаз предоставляет макроскопическую информацию о взаимосвязи между областями. Наконец, мы рассматриваем вопрос о зависимости пиков от пространственных паттернов мезомасштаба, а также влияние изменений, зависящих от задачи, на предсказуемость пиков. Учитывая сильные связанные с событиями изменения в амплитуде бета-сигнала как во время MC, так и во время BC (рис. 2B, E), мы сначала исследовали зависимость частоты всплесков только от амплитуды бета (пренебрегая бета-фазой или разницей в фазе бета-излучения между сайтами).Мы называем эту функциональную зависимость между бета-амплитудой и частотой всплесков картированием амплитуды в частоту, что согласуется с идеей, что данный нейрон реагирует как на внутренние, так и на внешние факторы (рис. 3). Этот анализ позволил сделать два основных вывода. Во-первых, в рамках данной задачи, такой как BC, популяция одновременно записываемых нейронов демонстрирует широкий диапазон ответов на изменения в амплитуде бета-излучения, при этом некоторые нейроны увеличивают активизацию, некоторые не показывают изменений, а другие снижают частоту их всплесков (рис. 4A, H – I; S2A – F; S10).Во-вторых, отдельный нейрон может демонстрировать зависящее от задачи переназначение функции амплитуды в частоту — например, данный нейрон может увеличивать срабатывание по мере увеличения амплитуды бета во время BC, но уменьшать срабатывание, когда амплитуда бета увеличивается во время MC (рис. 4B). –G, J – K; S1A – F; S2G – H). Более подробно ниже мы рассматриваем i) разнообразие отображений амплитуды в частоту внутри задачи, наблюдаемое во всем ансамбле нейронов, и ii) разнообразие переназначений амплитуды в частоту, которые могут происходить в одном нейроне при переключении с одна задача к другой.В задачах MC и BC статистическая зависимость между частотой спайков и амплитудой бета наблюдалась для 86,7% исследованных корковых мотонейронов (p, 0,01 нескорректированный рандомизированный критерий перестановки; см. Таблицу S1). То есть для данного нейрона плотность спайков, обусловленная низкой амплитудой бета, отличается от плотности спайков, обусловленной высокой амплитудой бета. Мы обнаружили, что эмпирически наблюдаемое отображение амплитуды в частоту хорошо описывается 4-параметрической сигмоидальной функцией (см. Материалы и методы).В популяции нейронов это отображение описывалось широким диапазоном параметров модели. Например, таблица S1 показывает, что по мере увеличения амплитуды бета во время BC 58,6% всех нейронов продемонстрировали снижение частоты спайков, в то время как 28,2% показали увеличение скорости спайков. По мере увеличения амплитуды бета во время MC 35,4% (40,3%) нейронов уменьшили (увеличили) частоту возбуждения. Важно отметить, что в то время как популяция нейронов демонстрировала широкий диапазон значений параметров во время данной задачи, параметры для отдельных нейронов показали высокую стабильность в разных сеансах одной и той же задачи (рисунки 4H, I; S2C, F).На рисунке 4A показан диапазон сопоставлений амплитуды в частоту во время BC для двенадцати примеров нейронов от обезьяны P. Точками показаны эмпирически наблюдаемые частоты всплесков, обусловленные бета-амплитудой, вычисленные отдельно для 25 неперекрывающихся интервалов амплитуды. Обратите внимание, что использовалось адаптивное разбиение на интервалы, так что каждый интервал включал в себя одинаковое количество точек выборки, что приводило к неравномерному интервалу интервалов. Линии указывают наиболее подходящие сигмоидальные функции, описывающие наблюдаемое отображение амплитуды в частоту (см. Материалы и методы).Некоторые нейроны показывают уменьшение плотности спайков с увеличением амплитуды бета, в то время как другие показывают увеличение плотности спайков. Кроме того, как показано для другого набора нейронов на рисунке S10, удаление смещений из-за базовой скорости всплесков показывает, что скорость изменения отображения (без учета знака) велика для одних нейронов (фиолетовый, золотой), умеренная для других ( зеленый, голубой) и маленький для остальных (черный, красный). Критически важно, что для данного нейрона знак и крутизна отображения амплитуды в частоту не коррелируют с базовой частотой активации клетки и различаются для разных клеток.Таким образом, изменение бета-амплитуды не означает стереотипного изменения плотности спайков, которое одинаково применимо ко всем нейронам; разные нейроны по-разному реагируют на изменения бета-амплитуды. То есть, в то время как усреднение по всем зарегистрированным клеткам показывает отрицательную корреляцию между частотой всплесков ансамбля и амплитудой бета-излучения, исследование каждой клетки по отдельности показывает, что некоторые нейроны демонстрируют сильную отрицательную корреляцию с амплитудой бета-излучения, другие — сильную положительную корреляцию, в то время как третьи показывают только слабая или незначительная зависимость от амплитуды (c.f. Рисунок 4H, I). Интересно, что хотя существует вариация точной точки пересечения для совокупности отображений амплитуды в частоту, то есть значения амплитуды, в котором сигмовидная функция пересекает базовую скорость, сопоставления амплитуды и частоты для многих нейронов пересекаются около средняя бета-амплитуда (рисунок S10). Во всех представленных здесь анализах средняя бета-амплитуда была нормализована к 1. Однако, хотя большинство сопоставлений амплитуды и скорости без базовой линии пересекаются около одной и той же бета-амплитуды (среднего значения), добавление различных базовых скоростей может сместить точку пересечения для пары отображений амплитуды в частоту.Например, на рисунке 4A показано пересечение сопоставлений амплитуды и частоты нейрона sig060a (голубой, внизу) с сопоставлениями амплитуды и частоты трех других ячеек: sig099a (синий), sig104a (оранжевый) и sig031a ( фиолетовый). Вертикальными линиями отмечены значения амплитуд в местах пересечения этих кривых. Для низких амплитуд бета sig060a (голубой) имеет более высокую частоту всплесков, чем другие 3 нейрона, в то время как для высоких амплитуд бета этот нейрон имеет более низкую скорость. Для промежуточных значений амплитуды sig060a имеет более высокую скорость, чем некоторые нейроны, но не другие.Большие различия в базовых показателях не приводят к перекрытию функций амплитуды и, следовательно, к изменению относительной … BC (красный), но порядок переключается во время MC (синий). Наконец, на преобразование фазы в частоту сильно влияет величина бета-амплитуды (рис. 6). Например, на рисунках 5A – D показаны преобразования фазы в частоту для 9 примерных ячеек, вычисленных отдельно для данных, попадающих в 4 бета-бина амплитуды (соответствующих 0–25, 25–50, 50–75 и 75–100-м бинам). процентили амплитуды).Относительные размеры преобразований фазы в скорость, показанные на рисунках 5A – D, в значительной степени аналогичны для четырех элементов разрешения по амплитуде, при этом все ячейки демонстрируют увеличение глубины модуляции между фазой и скоростью (обратите внимание на вертикальный масштаб на рисунке 6A – D). . Это увеличение глубины межфазной модуляции в зависимости от бета-амплитуды явно показано на рисунке 6E. Однако не все ячейки меняют свою глубину модуляции с одинаковой скоростью — по мере увеличения бета-амплитуды некоторые ячейки увеличивают свою глубину модуляции между фазой и скоростью быстрее, чем другие.Таким образом, в то время как sig045a (черный) начинается с наибольшей частоты срабатывания при низких амплитудах бета, при высоких амплитудах бета он опустился на 3 место среди 9 показанных нейронов. Аналогично, sig029a (синий) опускается с ранга 2 на ранг 5, тогда как sig043c (фиолетовый) перемещается с ранга 4 на ранг 2. В дополнение к этим дифференциальным изменениям в общей глубине межфазной модуляции как функции от амплитуды бета есть также могут быть сдвиги в значении фазы, связанные с точкой пересечения преобразований фазы в частоту для пары нейронов.Это может быть так, даже если каждый нейрон поддерживает один и тот же предпочтительный угол бета. Например, преобразования фазы в частоту для sig043c (фиолетовый) и sig029a (синий) пересекаются около 2 3 радиан при низких амплитудах бета (вертикальная линия), но смещаются примерно до 2 1,3 радиана для высоких амплитуд бета, хотя предпочтительный бета-фаза для каждой ячейки остается прежней. Косинусоидальное преобразование фазы в частоту является нелинейной функцией фазы, и в сочетании с дифференциальными изменениями вертикальной шкалы в зависимости от амплитуды эти смены рангового порядка скорости всплесков в зависимости от фазы бета могут происходить, даже когда каждый Ячейка не изменила свой предпочтительный фазовый угол бета.В то время как (в рамках задачи) предпочтительный угол бета-фазы между фазой и скоростью в значительной степени стабилен для большинства нейронов во всем диапазоне бета-амплитуд (рис. S4), изменение глубины межфазной модуляции можно описать квадратичной функцией. бета-амплитуды (Рисунок 6F). Мы называем этот термин, описывающий управление усилением глубины модуляции между фазой и скоростью, весовым коэффициентом или преобразованием амплитуды в вес. Этот весовой коэффициент является сублинейной функцией амплитуды для одних нейронов (sig029a, синий), почти линейной для других (sig038a, желтый) и надлинейной для других (sig027a, черный).Несмотря на эту изменчивость, для всех нейронов большие бета-амплитуды связаны с большей глубиной модуляции. То есть бета-амплитуда, по-видимому, действует как регулятор усиления для бета-фазы, так что бета-фаза более предсказывает время всплеска, когда бета-мощность высока, чем когда бета-мощность низкая. Однако точно так же, как неоднородность тонических базовых показателей и сигмоидальные функции зависимости амплитуды от частоты взаимодействуют, чтобы установить упорядоченный набор состояний рангового порядка ансамбля, которые индексируются бета-амплитудой, неоднородностью ансамбля по глубине межфазной модуляции и квадратичной весовой коэффициент может взаимодействовать, чтобы установить упорядоченный набор состояний порядка ранжирования, проиндексированных фазой бета-тестирования.То есть для заданной бета-амплитуды набор перекрывающихся отображений фаза-скорость имеет точки пересечения, которые возникают на определенных бета-фазах (вертикальная линия на рисунке 6A). Однако по мере изменения амплитуды бета эти точки пересечения могут сместиться в новые фазы (вертикальная линия на рисунке 6D). Кроме того, разные базовые уровни тоники могут заставить некоторые точки пересечения исчезнуть или ввести новые пересечения. Таким образом, отображения как амплитуды в частоту, так и фазы в частоту, рассматриваемые в ансамбле нейронов, могут быть связаны с упорядоченными наборами нейронов, где клетки сортируются в соответствии с мгновенной частотой спайков.Тем не менее, одним из следствий этого взаимодействия между амплитудой и глубиной межфазной модуляции является то, что предпочтение по времени всплеска по сравнению с бета-фазой становится сильнее при более высокой бета-мощности. Например, мы видели выше, что нейрон sig038a срабатывает раньше нейрона sig045a в 61,0% случаев, если смотреть на все бета-циклы, когда каждая клетка срабатывает один раз. Сортировка этих индивидуальных циклов по амплитуде бета, однако, показывает, что пики sig038a до sig045a только 56,2% времени для циклов с самыми низкими децильными амплитудами бета по сравнению с 72.0% времени для циклов в наивысшем дециле бета-амплитуд. Подобные эффекты наблюдаются в популяции, и, таким образом, вариации бета-амплитуды влияют на вероятность наблюдения произвольных временных последовательностей всплесков в ансамбле. Как и в случае преобразования амплитуды в частоту, преобразование фазы в частоту демонстрирует изменения, связанные как с задачей, так и с этапом испытаний (рисунки S6, S7). Как показано на рисунке 3, нейроны реагируют как на внутренние, так и на внешние факторы, включая время испытания и целевое направление.Одна возможность состоит в том, что изменения в отображении амплитуды и фазы в частоту могут возникать из-за взаимодействия множества внешних и внутренних факторов, каждый из которых влияет на общую частоту всплесков. Например, рисунки 3B – C показывают, что частота спайков, специфичных для цели, для нейронов может охватывать широкий диапазон значений от наиболее предпочтительных до наименее предпочтительных целей. Точно так же на рис. 7 показаны соотнесения фазы и частоты для конкретных целей для 6 примеров нейронов во время BC. Каждый нейрон показывает изменения в базовой скорости, которая является функцией направления цели или идентификатора цели.Например, на рисунке 7A показано, что sig045b имеет самую высокую базовую скорость для цели 8 (черный) и самую низкую базовую скорость для цели 4 (зеленый). Однако удаление этого специфичного для цели смещения базовой линии, как это сделано для той же ячейки на рисунке 7E, показывает, что глубина межфазной модуляции также демонстрирует специфичные для цели изменения — фактически, специфичные для цели базовые скорости sig045b равны положительно коррелировал со специфическими для цели изменениями глубины межфазной модуляции (рис. 7M, точки). Аналогичным образом, sig038a демонстрирует целевые вариации как в базовых скоростях (Рисунок 7B), так и в глубине модуляции между фазами (Рисунок 7F), также с положительной корреляцией между ними (Рисунки 7M, кружки).Тем не менее, sig043b и sig020a демонстрируют небольшое специфическое для цели изменение глубины модуляции между фазой и скоростью (Рисунки 7G, H), несмотря на сильное специфическое для цели изменение их базовой активности (Рисунки 7C, D). Фактически, наклон линии регрессии между целевой базовой скоростью и глубиной модуляции близок к нулю (рис. 7M, ромбы и крестики). С другой стороны, такие клетки, как sig073b и sig043c, демонстрируют отрицательную корреляцию (рис. 7M, звездочки и квадраты). Таким образом, хотя отображение амплитуды в частоту может показывать специфичные для цели изменения, функциональная природа этой взаимосвязи остается неясной.Поскольку плотность спайков данного нейрона зависит от взаимодействия между бета-амплитудой и фазой, наиболее полную картину зависимости между частотой спайков и бета-ритмом дает полное отображение бета-частоты (где термин « бета » здесь подразумевается как бета-амплитуда, так и бета-фаза). То есть, оцененная частота всплесков R BETA (a, h) представляет собой сумму двух членов: только амплитудной скорости R AMP (a), заданной отображением амплитуды в частоту, и другого члена, который является произведением фазовый коэффициент R (h) и весовой коэффициент, который является функцией…

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.
  Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
  браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.
  Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

электрически настраиваемых кварцевых генераторов — Wenzel Associates, I.

Механическая и / или электрическая настройка предусмотрена в большинстве кварцевых генераторов для регулировки частоты для фазовой синхронизации или модуляции или для компенсации длительного дрейфа. Механическая настройка часто выполняется с помощью одно- или многооборотного подстроечного конденсатора или катушки индуктивности в кристаллической цепи, доступ к которой осуществляется через отверстие в корпусе генератора.

Большинство генераторов Wenzel Associates используют варакторный диод для всех настроек, а механическая настройка выполняется внутри прецизионным потенциометром, подключенным к прецизионному опорному напряжению.Наши испытания показали, что механическая стабильность и гистерезис подстроечных потенциометров высочайшего качества превосходят стабильность подстроечных конденсаторов высочайшего качества. Электрическая настройка выполняется с помощью того же варакторного диода в конфигурации, обеспечивающей высокую линейность настройки. Напряжение механической настройки от потенциометра подается на катод настроечного диода, а электрическое настроечное напряжение подается на анод диода через цепь развязки сигналов. Электрическая настройка может быть сосредоточена вокруг нуля вольт, так что при отсутствии входа генератор возвращается к средней точке электрической настройки.

В качестве опции внутреннее опорное напряжение генератора может быть выведено на контакт для подключения к многооборотному потенциометру для точной настройки. В качестве альтернативы, на электрический настроечный штифт может подаваться чистый постоянный ток, полученный от отдельного источника питания. Если доступные источники питания зашумлены или нестабильны, может быть желательно добавить стабилитрон или опорное устройство и фильтр шума нижних частот. Стабилитрон с температурной компенсацией, такой как 1N821, является отличным выбором, обеспечивающим хорошую температурную стабильность и очень низкий уровень шума — в большинстве случаев конденсатор фильтра 22 мкФ, показанный ниже, может быть исключен.Эталонные устройства демонстрируют отличную стабильность, но они часто имеют довольно высокое напряжение шума, поэтому рекомендуется дополнительная фильтрация.

Вот несколько моментов, которые следует учитывать:

• Величина диапазона настройки, который может быть предоставлен, является функцией частоты кристалла, среза, обертона и размера пятна (или подвижной емкости). Прецизионные низкочастотные генераторы, использующие кристаллы SC-среза третьего обертона, будут иметь диапазон настройки всего лишь пару частей на миллион, тогда как основные кристаллы АТ-среза с большим размером пятна могут достигать более тысячи частей на миллион.
• Полоса пропускания и крутизна настройки входа электрической настройки могут быть указаны для приложений ФАПЧ.
• Во время отгрузки печные генераторы могут демонстрировать суточную скорость старения, которая быстро потребляет весь диапазон механической настройки. Это быстрое старение значительно уменьшится в течение нескольких недель работы при температуре печи.

Генераторы печи

• могут использовать высокоточные, «жесткие» кристаллы, поскольку они работают при одной температуре, и настройка только компенсирует старение, тогда как TCXO должны настраиваться достаточно далеко, чтобы устранить температурные эффекты, а также компенсировать старение.
• Когда образец старения генератора печи установлен (обычно восходящий дрейф), частота может быть смещена в противоположном направлении во время калибровки, что почти удвоит время цикла калибровки.
• Линейность обычно указывается как процент от общего отклонения настройки от прямой линии, соответствующей кривой настройки. Спецификация линейности 10% допускает отклонение на 100 Гц от наилучшей прямой линии для генератора с диапазоном настройки 1 кГц.Потенциальная проблема заключается в том, что это отклонение может быстро произойти на одном конце диапазона, как показано ниже. Наклон значительно ниже в верхней части кривой, несмотря на то, что осциллятор соответствует довольно жестким характеристикам линейности. Для систем ФАПЧ, в которых крутизна настройки влияет на стабильность контура, может оказаться целесообразным указать минимальную и максимальную крутизну настройки во всех точках кривой в дополнение к процентной линейности.

Использование прецизионных генераторов с внешними опорами

Многие приборы, использующие прецизионные кварцевые генераторы в качестве внутреннего источника опорной частоты, также могут принимать внешний опорный сигнал.Выбор внутреннего или внешнего может быть сделан путем ручного нажатия переключателя, или он может запускаться автоматически при наличии сигнала на входном разъеме внешнего опорного сигнала. В простейших случаях ручной переключатель просто выбирает, какой источник сигнала направить на прибор, и подключает неиспользуемый источник соответствующим резистором. Когда внутренним эталоном является генератор печи, часто желательно иметь вход «подавления сигнала», чтобы выключить генератор, оставив печь работающей.TCXO и некомпенсированные генераторы могут быть отключены при наличии внешнего опорного сигнала, чтобы избежать возможных помех.

Входы подавления сигнала обычно принимают обычные уровни TTL, но их можно без труда настроить для пользовательских уровней переключения. Большинство входов подавления сигнала предназначены для плавного перехода в состояние «включено», когда они не подключены, а внутренняя RC-схема защищает генератор от повреждающих напряжений или мешающих радиочастотных сигналов, которые могут присутствовать в линии управления. Схема, показанная ниже, обнаружит наличие внешнего опорного напряжения больше 1 вольт от пика до пика и сгенерирует логический «низкий» уровень, подходящий для управления большинством входов подавления сигнала.Этот управляющий сигнал можно также использовать для стробирования внешнего входа в схему прибора. Схема спроектирована таким образом, чтобы иметь довольно высокий входной импеданс, поэтому правильная заделка кабеля предполагается в другом месте прибора.

Если ожидается, что внутренний генератор будет иметь лучшую краткосрочную стабильность, чем внешний опорный сигнал, может быть желательно синхронизировать по фазе внутренний генератор с опорным сигналом. Синхронизированный генератор будет демонстрировать хорошую краткосрочную стабильность внутреннего кварцевого генератора и хорошую долгосрочную стабильность внешнего опорного сигнала.Простой контур первого порядка может быть выполнен с помощью устройства шины с тремя состояниями или аналогового переключателя и нескольких дополнительных частей. Основная идея состоит в том, чтобы управлять трехуровневым управлением с помощью внешнего опорного сигнала и пропускать сигнал внутреннего генератора через один из трехступенчатых вентилей, так что опорный сигнал производит выборку сигнала внутреннего генератора. Выходной сигнал затвора с тремя состояниями фильтруется с помощью фильтра нижних частот для удаления радиочастотных частот и подключается к электрической настройке внутреннего генератора. Линия управления с тремя состояниями смещена так, что выход затвора «плавает», когда внешнее задание отсутствует.Это состояние с высоким импедансом позволяет подтягивать линию настройки резистором большого номинала, подключенным к потенциометру настройки, когда нет внешнего опорного сигнала. 74HC244 имеет два набора из четырех буферов с тремя состояниями и является хорошим выбором, поскольку четыре неиспользуемых логических элемента могут использоваться для буферизации сигналов.

В следующей схеме используется тот же метод с использованием только двух устройств CMOS, шестнадцатеричного инвертора 4069 и аналогового переключателя 4016 или 4066. Потенциометр подстройки частоты регулирует частоту при отсутствии задания.Схема также включает драйвер светодиода для индикации наличия внешнего опорного сигнала. Значения компонентов не являются особо важными, и оптимальные значения будут зависеть от области применения.

Показанная схема представляет собой контур первого порядка с большинством прецизионных генераторов. Например, термогенератор на 10 МГц может иметь чувствительность настройки 1 Гц на вольт, а при напряжении питания 15 вольт наклон фазы составляет около 3 вольт на радиан. Полоса пропускания контура первого порядка является произведением чувствительности настройки и наклона фазы (1 Гц / вольт x 3 вольт / рад.= 3 Гц), что значительно ниже частоты спада сети 10 кОм и 10 нФ. Если генератор имеет гораздо более высокую чувствительность настройки, ширина полосы будет пропорционально выше, и может потребоваться отклик второго порядка для уменьшения внешнего опорного шума. Хотя может быть добавлена ​​традиционная схема операционного усилителя типа 2 с интегратором с потерями, потребуются дополнительные меры для управления частотой в отсутствие опорного сигнала, поскольку интегратор будет иметь тенденцию блуждать по одной из шин питания.Альтернативный способ добиться отклика второго порядка при сохранении автоматического переключения настройки — это добавить дополнительный пассивный фильтр. Этот контур второго порядка типа 1 легко достигается путем добавления к выходу последовательного резистора 100 кОм или больше. Другой резистор, соединенный последовательно с конденсатором, теперь добавлен к земле на выходе, чтобы добавить дополнительный спад. Может возникнуть соблазн просто увеличить емкость конденсатора 10 нФ для достижения более низкой полосы пропускания, но затухание может стать неприемлемо низким. Фактически, если генератор имеет очень широкий диапазон настройки, 10 нФ может быть слишком большим для достаточного демпфирования.(В большинстве эталонных приложений показанный цикл первого порядка обычно хорош, поскольку фазовая ошибка не важна, а пропускная способность блокировки не критична.)

Примечания:

• Вышеупомянутая схема работает на частотных пределах устройств на 10 МГц, но источник питания 15 В дает около 12 В размаха напряжения настройки без усиления. Устройства HCMOS улучшат высокочастотные характеристики, но более низкое напряжение питания 5 В даст меньший диапазон настраиваемого напряжения (менее 5 вольт).Для генераторов, требующих большего размаха напряжения настройки, можно добавить усилитель. Чтобы рассчитать полосу пропускания такой системы, умножьте коэффициент усиления усилителя на 1,5, чтобы получить усиленный наклон фазы (прямоугольная волна 5 В даст наклон фазы 1,5 В / радиан), а затем умножьте на чувствительность настройки генератора.
• Для входа опорного сигнала может потребоваться заземление резистора на опорной стороне конденсатора 100 нФ для правильного согласования входа.
• Схема может быть построена с вентилями с тремя состояниями, но если они не инвертирующие вентили, тогда потребуется другая схема смещения.Не забудьте смещать внешние опорные вентили, чтобы они отключали трехступенчатое управление при отсутствии сигнала.
• Вход настройки генератора должен иметь высокий импеданс (МОм). Добавьте повторитель напряжения для управления входами с более низким импедансом.

Также прочтите о высокопроизводительных шлейфах типа 2 с генераторами сверхмалого шума.

Посмотреть каталог генераторов

Внешний регулятор настройки Huma BSA Scorpion 1200 SE

Внешний регулятор настройки Huma BSA Scorpion 1200 SE

Для скорпиона.25 моделей SE и модели Scorpion SE 1200 у нас есть модельный регулятор, доступный специально для настоящих ценителей мощности.
Этот внешний регулятор ввинчивается между напорной трубкой и блоком манометра.

Отличие от обычного регулятора BSA «SE» состоит в том, что в этом регуляторе используется оригинальный корпус манометра, что дает ему гораздо больший регулируемый объем.
Таким образом, он специально разработан для винтовки .25 scorpion 1200 SE или .22 с экстремальными уровнями мощности.
После сборки манометр покажет регулируемую мощность.
Его очень легко установить на винтовку, просто сбросьте давление в винтовке, открутите трубку давления и прикрутите регулятор на место, и все готово.

Для Scorpion 1200 SE калибра .177 и .22 вы также можете выбрать регулятор BSA «SE».

Преимущества этого регулятора перед другими регуляторами, присутствующими в настоящее время на рынке:
Более высокая точность вашей винтовки за счет исключения колебаний скорости пули.
Постоянная скорость гранул во всем диапазоне рабочего давления.
Это сразу даст вам лучший счетчик выстрелов и полную серию выстрелов.
Корпус регулятора изготовлен из чрезвычайно прочной стали 42Cr.
Испытано на рабочее давление, как минимум в 3 раза превышающее рабочее давление винтовки, для безопасности каждого.
Примерка своими руками — реальный вариант для большинства людей.
Высококачественное воронение, такого же цвета, как и оригинальная напорная трубка BSA.
Добавление регулятора к вашей пневматической винтовке, вероятно, принесет вам наибольшую пользу в процессе настройки.

При заказе одного из наших регуляторов вы получите:
Ваш регулятор настроен на ваши собственные пожелания.
Шкала давления в барах на регуляторе для точной настройки или повторной настройки.
Мы добавим наклейку на казенную часть с надписью «Регулируется по системе Huma».
Инструкции по установке в формате pdf скачать.

Настройки давления регулятора:
Регуляторы входят в стандартный диапазон среднего давления (MP: выход 70-150 бар).
Они поставляются предварительно настроенными на наиболее распространенную настройку давления, или мы скорректируем ее в соответствии с вашими личными пожеланиями.
Он также оснащен четкой этикеткой со шкалой давления, поэтому вы можете очень легко перенастроить или точно настроить настройку давления в соответствии с вашими пожеланиями.

Huma-Air Quality Control:
Регуляторы Huma производятся с ЧПУ из высококачественного авиационного алюминия и бронзы.
Чтобы гарантировать безупречный продукт, каждый регулятор вручную собирается, тестируется и настраивается на требуемое давление.
Мы используем только высококачественные материалы, а наши пружины Belleville предназначены для критических применений, чтобы обеспечить высочайшую точность повторения.
Это дает нашим регуляторам разницу в повторяемости цикла менее 1%.

Свяжитесь с нами, если вам нужна настройка, и мы будем рады сделать это за вас.

Если у вас есть дополнительные вопросы об указанном продукте, вы можете использовать приведенную выше ссылку «Задать вопрос»

Парадоксально редкая настройка хемосенсоров при широкой интеграции внешних гранулярных клеток в дополнительную обонятельную луковицу мыши

Abstract

Дополнительная обонятельная луковица (AOB), первая нейронная цепь в дополнительной обонятельной системе мыши, имеет решающее значение для интерпретации социальных хемосигналов.Несмотря на свою важность, обработка информации AOB плохо изучена по сравнению с основной обонятельной луковицей (MOB). Здесь мы стремились заполнить пробелы в понимании функции интернейронов АОБ. Мы использовали 2-фотонную визуализацию GCaMP6f Ca ²⁺ в препарате ex vivo для изучения хемосенсорной настройки в внешних гранулярных клетках AOB (EGC), интернейронах, предположительно подавляющих активность в возбуждающих митральных клетках (MC). В препаратах ex vivo от мышей обоего пола мы измерили настройку MC и EGC на смеси естественных хемосигналов и мономолекулярные лиганды, обнаружив, что настройка EGC была более разреженной, а не более широкой, чем настройка MCs выше по течению.Одновременная электрофизиологическая запись и визуализация Ca ²⁺ не показали различий в отношениях GCaMP6f-spiking в этих типах клеток во время симулированной сенсорной стимуляции, предполагая, что измеренная разреженность EGC не была связана с зависимой от типа клеток изменчивостью в производительности GCaMP6f. Ex vivo записи патч-кламп показали, что подпороговая чувствительность EGC была намного шире, чем показано с помощью визуализации GCaMP6f Ca ²⁺ , и что мономолекулярные лиганды редко вызывали выброс EGC.Эти результаты показывают, что EGCs выборочно задействованы хемосенсорными смесями, подтверждая различные роли EGCs, чем аналогичные интернейроны в MOB.

ЗНАЧИМОЕ ЗАЯВЛЕНИЕ Обонятельная система мыши (AOS) интерпретирует социальные хемосигналы, но мы плохо понимаем обработку информации AOS. Здесь мы исследуем функциональные свойства внешних гранулярных клеток (EGCs), основного класса интернейронов в дополнительной обонятельной луковице (AOB). Мы предположили, что EGCs, которые плотно иннервируются возбуждающими митральными клетками (MCs), будут демонстрировать широкую хемосенсорную настройку, предполагая роль в нормализации деления.Используя визуализацию ex vivo GCaMP6f, мы обнаружили, что EGCs были настроены более редко, чем MC. Это происходило не из-за более слабой передачи сигналов GCaMP6f в EGC, чем в MC. Вместо этого мы обнаружили, что многие активирующие MC хемосигналы вызывают только подпороговые ответы EGC. Это указывает на иную роль AOB EGCs по сравнению с аналогичными клетками в основной обонятельной луковице.

Введение

Социальное поведение включает в себя мультимодальные сенсорные входы, каскады обработки информации, проводимые многоуровневыми нейронными цепями, и сложные поведенческие выходы.Внутри каждой области мозга взаимодействия между основными нейронами и интернейронами формируют мотивы нейронных цепей, фундаментальные вычислительные строительные блоки для обработки информации (Braganza and Beck, 2018). У мышей и многих млекопитающих дополнительная обонятельная система (АОС) необходима для выражения типичного социального поведения, но многие основы ее организации и функции остаются неясными. AOS обнаруживает нелетучие хемосигналы, включая феромоны (для внутривидовой коммуникации) и кайромоны (для межвидовой коммуникации; Mohrhardt et al., 2018). У грызунов первой специализированной нейронной цепью для обработки информации хемосигнала является дополнительная обонятельная луковица (АОБ).

Основные нейроны АОБ, известные как митральные клетки (МК), сильно модулируются локальными ГАМКергическими интернейронами, а ГАМКергическая модуляция в АОБ оказывает значительное влияние на поведение (Kaba and Nakanishi, 1995; Brennan, 2001; Hendrickson et al., 2008). Например, микроинфузия блокатора ГАМКергической передачи в АОБ может блокировать беременность (Kaba and Keverne, 1988).Во многих исследованиях показано участие ГАМКергических интернейронов AOB в социальном поведении и хемосенсорной пластичности, зависящей от опыта (Brennan et al., 1995; Matsuoka et al., 1997, 2004; Brennan and Binns, 2005; Kaba and Huang, 2005; Araneda and Firestein, 2006). ; Hendrickson et al., 2008; Cansler et al., 2017; Gao et al., 2017). В совокупности эти наблюдения подтверждают, что коммуникация MC-интернейрон в AOB является критической для физиологии и поведения грызунов.

Несмотря на недавний прогресс, нам не хватает информации о том, как MC взаимодействуют с несколькими тормозящими нейронными типами.AOB имеет множество интернейронов, которые были классифицированы на основании их местоположения и морфологии (Larriva-Sahd, 2008; Moriya-Ito et al., 2013). Юкстагломерулярные клетки (JGC) находятся в поверхностном слое клубочков, где возбуждающие сенсорные сигналы от вомероназального органа (VNO) входят в AOB. Внутренние гранулярные клетки (ВГК), наиболее распространенный и хорошо изученный тип интернейронов АОБ, расположены во внутреннем гранулярном слое. Внешние гранулярные клетки (EGC) находятся во внешнем клеточном слое рядом с сомами MC.Считается, что JGCs, подобные аналогам в основной обонятельной луковице (MOB), модулируют входные данные в MC через их синаптические связи с окончаниями аксонов VNO и апикальными дендритами MC внутри клубочков (Geramita and Urban, 2017). EGCs и IGCs, напротив, как полагают, модулируют активность MC посредством более глубоких реципрокных дендродендритных связей (Taniguchi and Kaba, 2001; Castro et al., 2007). По сравнению с JGC и IGC очень мало информации о физиологии или функции AOB EGC; Сообщалось только об одном целевом исследовании их внутренних свойств (Максимова и др., 2019).

Клетки, которые кажутся аналогичными AOB EGC, были изучены в MOB. В частности, интернейроны, экспрессирующие парвальбумин MOB во внешнем плексиформном слое (интернейроны PV-EPL), напоминают EGCs по своей морфологии и очевидной широкой связности с MCs. Эти интернейроны MOB PV-EPL, как было показано, интегрируют возбуждающую информацию от множественных MCs, приводя к более широким полям рецепции одорантов, чем MCs (Kato et al., 2013). В этом контексте широкая настройка интернейронов PV-EPL, наряду с их способностью к латеральному ингибированию MC, поддерживает так называемую делительную нормализацию или масштабирование усиления.Эта функция нормализации разделения привела к увеличению уровней ингибирования MC по мере того, как больше MC было задействовано сенсорным стимулом, эффект, который, как считается, ограничивает популяционную активность и сохраняет сенсорную дискриминацию во всех диапазонах концентраций (Kato et al., 2013; Miyamichi et al., 2013). Учитывая сходство между интернейронами MOB PV-EPL и AOB EGCs, мы предположили, что AOB EGCs будут демонстрировать широкую хемосенсорную настройку и выполнять делительную нормализацию MCs посредством своих тормозных дендродендритных синапсов.

Здесь мы описываем первое целевое исследование AOB EGCs в контексте хемосенсорной функции. Используя трансгенную мышь, экспрессирующую Cre ( Cort -T2A-Cre), которая избирательно маркирует подмножества EGC AOB (Taniguchi et al., 2011; Maksimova et al., 2019), мы измерили активацию EGC лигандами AOS в ex vivo раннего препарата AOS, обнаружившего неожиданно редкую активацию по сравнению с MC и JGC. Запись прикрепленных к клеткам неплотно закрытых клеток на EGC не показала различий в производительности GCaMP6f в EGC по сравнению с MC в контексте натуралистической стимуляции.Цельноклеточные записи ex vivo показали широкую подпороговую активацию EGC, но большинство EGC активировались только в ответ на естественные хемосенсорные смеси (например, мочу или кал мышей). Отсутствие широкой пиковой активности в AOB EGCs предполагает, что EGC не поддерживают разделяющую нормализацию в контексте небольшого количества одорантов, но могут делать это в богатой феромонами среде. В целом, эти исследования предоставляют новую информацию о роли AOB EGCs в сенсорной обработке AOS и накладывают важные ограничения на наши модели функции цепи AOB.

Результаты

Осуществление визуализации клеточного типа GCaMP6f Ca

²⁺ в AOB ex vivo

AOB мыши остается одной из наиболее плохо изученных основных сенсорных цепей в головном мозге млекопитающих. Основная причина этого дефицита — ограниченное количество исследований сенсорных ответов нейронов АОБ. В нескольких исследованиях in vivo, и ex vivo, изучались сенсорные реакции MC, но исследований функции интернейронов крайне не хватает (Luo et al., 2003; Хендриксон и др., 2008; Бен-Шауль и др., 2010; Микс и др., 2010; Дойл и др., 2016). Мы использовали комбинацию ex vivo сенсорных препаратов, которые сохраняют связь VNO – AOB (Meeks and Holy, 2009) с 2-фотонной визуализацией GCaMP6f для измерения сигналов Ca ²⁺ в определенных популяциях нейронов АОБ (рис. 1 A ).

Рисунок 1.

A , Обзор изображений e x vivo Ca ²⁺ . Слева: панель стимулов, доставленная в VNO для стимулирования активности в AOB.Включены смеси природных лигандов (разведенная 1: 100 моча мышей BALB / c и разведенные 1: 300 фекалии мышей) и 11 мономолекулярных сульфатированных стероидов при 10 мкм. Справа, схема цепи AOB. B , Необработанные изображения флуоресценции GCaMP6f во время экспериментов по визуализации ex vivo Ca ²⁺ на MC AOB. MC экспрессировали GCaMP6f посредством инфузии Cre-зависимых AAV в AOB Pcdh31 -Cre трансгенных мышей за ≥3 недель до регистрации. Пронумерованные области интереса обозначают три выделенных MC с разными настройками.Масштабная линейка 50 мкм. C , измерения ΔF / F из трех ячеек, выделенных в B , в двух рандомизированных повторах. Цифры над серыми вертикальными полосами указывают на применяемый стимул, а цвета соответствуют панели стимулов в A .

Важным моментом для любого исследования настройки хемосенсоров является то, что измеряемые рецептивные поля критически зависят от выбора хемосенсорных сигналов и концентраций. В некоторых физиологических исследованиях настройки АОБ использовались исключительно естественные смеси хемосенсорных сигналов (например,г., разбавленная моча и слюна; Хендриксон и др., 2008; Бен-Шауль и др., 2010; Tolokh et al., 2013), тогда как другие использовали как смеси природных хемосигналов, так и мономолекулярные лиганды VNO (Meeks et al., 2010; Doyle et al., 2016; Doyle and Meeks, 2017). Мы решили использовать как естественные, так и мономолекулярные стимулы; мы выбрали панель, которая включала разбавленную мочу мышей, экстракты фекалий и мономолекулярные сульфатированные стероидные лиганды, аналогичные тем, которые использовались в предыдущих исследованиях (Meeks et al., 2010; Turaga and Holy, 2012; Doyle et al., 2016). Мы сначала зарегистрировали сенсорную настройку этой панели одорантов в AOB MCs посредством вирусного или трансгенного управления GCaMP6f у трансгенных мышей Pcdh31 -cre (Nagai et al., 2005). Мы наблюдали надежную, синхронизированную по времени, управляемую стимулом хемосенсорную активность в популяциях MC AOB в нескольких испытаниях стимулов (рис. 1 B , C , фильм 1). Ответы GCaMP6f на 8-секундные попытки стимулирования были большими по амплитуде (пиковые амплитуды ΔF / F, от ∼0,4 до ∼3,2) и медленными до пика и затухания (время пика, 7–12 с от начала стимуляции; время затухания, 8–14 с). , что согласуется с динамикой срабатывания потенциала действия, наблюдаемой в МК с аналогичными условиями стимуляции (Hendrickson et al., 2008; Микс и Холи, 2009). Создание изображения GCaMP6f 2-фотонного Ca ²⁺ в препарате ex vivo позволило нам исследовать свойства сенсорной настройки генетически определенных типов клеток АОБ.

Визуализация GCaMP6f митральных клеток подтверждает широкую хемосенсорную интеграцию

Интернейроны AOB в основном возбуждаются глутаматергическим сенсорным входом от AOB MCs (Brennan and Keverne, 1997; Taniguchi and Kaba, 2001). Настройка MC AOB на аналогичную панель хемосенсорных стимулов была охарактеризована с использованием внеклеточных единичных записей (Meeks et al., 2010). Однако, поскольку платформа визуализации GCaMP6f представляет собой новый подход, мы сначала хотели исследовать свойства настройки генетически определенных MC и сравнить эти измерения с предыдущими результатами (рис. 2). Вирусно-управляемая флуоресценция GCaMP6f у мышей Pcdh31 -cre наблюдалась в телах клеток и апикальных дендритах MCs, распространяющихся через ECL и клубочковый слой (Fig. 1 B ). Мы сосредоточили наши записи на GCaMP6f-положительных сомах, которые все были расположены ниже гломерулярного слоя АОБ (> 70 мкм от поверхности АОБ).

Рисунок 2.

Хемосенсорная настройка МК. A , Усредненные трассы отклика из примера MC. Следы были сглажены подгонкой локальной полиномиальной регрессии. Заштрихованные области представляют 95% доверительные интервалы. B , вверху, график тепловой карты нормированного ΔF / F для 266 MC. Внизу, бинарная тепловая карта отклика MC; красные плитки обозначают ответ на стимул, который соответствует статистическим критериям. C , слева, гистограмма, показывающая количество эффективных стимулов на клетку.Записанные клетки классифицируются на три группы с цветовой кодировкой в ​​зависимости от их чувствительности. Справа: круговая диаграмма, показывающая состав зарегистрированных популяций МС.

Мы зарегистрировали хемосенсорную активность 266 MC AOB (рис.2 B ), когорта более чем в два раза больше, чем в предыдущих электрофизиологических исследованиях (Hendrickson et al., 2008; Ben-Shaul et al., 2010; Meeks et al. , 2010; Толох и др., 2013). В соответствии с предыдущими результатами, разбавленная моча и кал самок мышей стимулировали сильную глобальную активность, которая началась вскоре после доставки стимула.Вызванная стимуляцией ΔF / F обычно достигала пика в течение первых 2 с 8-секундной доставки стимула VNO и демонстрировала медленную кинетику затухания (время затухания, 8–12 с после пика). Поскольку кинетика распада GCaMP6f (Chen et al., 2013) намного быстрее, чем предыдущие измерения спада частоты спайков, медленность времен смещения GCaMP6f, вероятно, отражает медленное прекращение пиковой активности в MC AOB (Luo et al., 2003; Wagner et al., 2006; Hendrickson et al., 2008; Ben-Shaul et al., 2010; Meeks et al., 2010; Mohrhardt et al., 2018). Из 266 исследованных нами MC 242 (91,0%) ответили по крайней мере на один из натуралистических стимулов, 199 (74,8%) ответили по крайней мере на один мономолекулярный сульфатированный стероидный лиганд и 125 (47,0%) ответили по крайней мере на два сульфатированных стероида. стероиды (рис.2 A ). Мы также наблюдали значительное количество (24 из 266; 9%) клеток Pcdh31 ⁺ , которые были исключительно чувствительны к одному или нескольким сульфатированным стероидам (рис. 2 C ). Анализ ответов на стимулы MC выявил стереотипные модели чувствительности к стероидам, которые согласовывались с предыдущими измерениями на основе пиков, предполагая, что измерения MC GCaMP6f точно отражают активность MC (рис.2 C ; Meeks et al., 2010).

Юкстагломерулярные клетки АОБ демонстрируют небольшое смещение в сторону натуралистических стимулов.

Активность МК АОБ формируется на нескольких уровнях ингибирующими интернейронами. Первая стадия ингибирования MC происходит в гломерулярном слое, где AOB JGC располагаются и высвобождают ГАМК на дендриты MC и пресинаптические терминалы VSN (Mohrhardt et al., 2018). Поскольку не было никаких систематических записей настройки интернейронов АОБ, мы сначала попытались измерить настройку в общей популяции ГАМКергических интернейронов АОБ.Поэтому мы экспрессировали GCaMP6f в интернейронах AOB путем стереотаксической инъекции AAV9.CAG.Flex.GCaMP6f в AOB трансгенных мышей Gad2 -IRES-Cre (Taniguchi et al., 2011). Большая популяция нейронов и дендритных ветвей в клубочковом слое АОБ и поверхностном внешнем клеточном слое была четко помечена и видна под 2-фотонным микроскопом (фильм 2). Плотность мечения GCaMP6f в более глубоких ECL, где находятся EGC сомы и IGC дендриты, парадоксальным образом препятствовала идентификации хорошо разрешенных нейрональных записей.Однако легко наблюдались нейроны в GL и поверхностных ECL, которые имели небольшой размер сомы (~ 10 мкм) и компактные дендриты, которые разветвлялись внутри гломерулярного слоя, что согласуется с анатомическими описаниями JGCs (Larriva-Sahd, 2008).

JGCs находятся в гломерулярном слое и воспринимают глутамат, высвобождаемый аксонами VSN и дендритами MC (Jia et al., 1999; Castro et al., 2007). Как и в случае MC, после хемосенсорной стимуляции VNO мы наблюдали большие, надежные ответы GCaMP6f в нескольких рандомизированных испытаниях (фильм 2).Разбавленные мышиные фекалии и моча BALB / c были двумя наиболее сильными активаторами JGC. В общей сложности 198 из 203 (97,5%) зарегистрированных JGC показали надежную реакцию на фекалии или мочу самок мышей (рис. 3 B , C ). В наборе данных JGC, 300-кратно разведенные фекалии самок мышей вызвали более сильную глобальную активность, чем 100-кратно разведенная моча самок мышей (рис. боковой / передний квадрант АОБ.Из 113 (55,7%) чувствительных к сульфатированным стероидам JGC 93 (45,8%) реагировали не более чем на два различных сульфатированных стероида и 9 (4,4%) реагировали более чем на четыре сульфатированных стероида (рис. 3 C ). Паттерны ответа JGC AOB на эту панель были в значительной степени аналогичны MC, но немного меньший процент JGC реагировал как на натуралистические стимулы, так и на мономолекулярные лиганды, чем MC AOB (рис.2 C , 3 C ), что позволяет предположить, что, как и ожидалось, основываясь на их ограниченных паттернах клубочковой иннервации, JGCs выполняют меньшую возбуждающую интеграцию, чем MCs.

Рисунок 3.

A , Пример изображений GCaMP6f JGC AOB Gad2 ⁺ при хемостимуляции. Активированные клубочки обозначены пунктирными линиями. Масштабная линейка 50 мкм. B , Усредненные кривые ΔF / F для трех примеров JGC. Следы были сглажены подгонкой локальной полиномиальной регрессии. Заштрихованные области указывают 95% доверительный интервал. Цветные звездочки указывают на идентичность ячеек в C . C , Вверху, Тепловая карта нормализованного ΔF / F для 203 JGC.Внизу, тепловая карта реакции на стимул JGC. Цветными стрелками обозначены записи, представленные в B . D , слева, гистограмма, показывающая количество эффективных стимулов на клетку. Записанные клетки были разделены на три группы с цветовой кодировкой по их избирательности. Справа: круговая диаграмма, показывающая состав записанных ответов JGC.

Визуализация EGC GCaMP6f указывает на чрезвычайно редкую хемосенсорную настройку

В первичных хемосенсорных цепях общий тормозной мотив включает широкую интеграцию интернейронов, которые выполняют делительную нормализацию или масштабирование усиления (Wilson et al., 2012; Като и др., 2013; Жанна и Уилсон, 2015). Было показано, что в MOB интернейроны PV-EPL выполняют эти функции, но неизвестно, существуют ли аналогичные ячейки в AOB. Казалось, что EGC хорошо соответствуют морфологическим и физиологическим особенностям нейронов MOB PV-EPL (Larriva-Sahd, 2008; Максимова и др., 2019). Многие EGC помечены у трансгенных мышей Cort -cre (Максимова и др., 2019), и этот факт мы использовали здесь для специфического воздействия на EGC при вирусной инфекции (рис.4 А ). Мы управляли экспрессией GCaMP6f в Cort ⁺ EGC посредством инъекции AAV9.CAG.Flex.GCaMP6f в AOB с последующей 2-фотонной визуализацией Ca ²⁺ в препаратах ex vivo .

Рисунок 4.

A , сагиттальный срез AOB от трансгенной мыши Cort -T2A-Cre, скрещенной с Cre-зависимой репортерной линией tdTomato. Шкала 200 мкм. B , Необработанные изображения GCaMP6f из трех примеров EGC. Шкала 10 мкм. C , Усредненные кривые ΔF / F трех ячеек, показанных в B . Следы были сглажены подгонкой локальной полиномиальной регрессии. Заштрихованные области представляют 95% доверительный интервал. Цветные звездочки указывают на идентичность клеток в D . D , Вверху, Тепловая карта нормализованного ΔF / F для 65 записанных EGC. Внизу: двоичная тепловая карта реакции на стимул EGC; красные плитки представляют пары, которые прошли статистические критерии.Цветные стрелки указывают ячейки и записи, представленные в B , C . E , слева, гистограмма чувствительности EGC, с настройкой, разделенной на три подгруппы с цветовым кодированием. Справа: круговая диаграмма классов ответов EGC.

Экспрессия

GCaMP6f была сконцентрирована в ECL АОБ (> 80 мкм от поверхности АОБ), но интенсивность базальной флуоресценции была чрезвычайно низкой по сравнению с клетками АОБ, инфицированными AAV, у мышей Pcdh31 -cre и Gad2 -cre (основная нейроны и JGC соответственно).Базовая интенсивность GCaMP6f была настолько низкой в ​​большинстве инфицированных EGC, что они не были обнаружены выше фона до тех пор, пока AOB не был активирован стимуляцией VNO (Материалы и методы; фиг. 4 B ). Идентифицированные EGC, экспрессирующие GCaMP6f, имели небольшой размер сомы, обширные разветвления, и, в случае, если исходная флуоресценция GCaMP6f была высокой (предположительно из-за потери целостности мембраны / гибели клеток), мы наблюдали большие разветвления, плотные в синаптических шипах или геммулах, все из которых были согласуется с предыдущими описаниями EGCs (Larriva-Sahd, 2008; Максимова и др., 2019).

Затем мы исследовали хемосенсорные свойства настройки EGC Cort ⁺ . К нашему удивлению, эти EGC продемонстрировали свидетельства чрезвычайно редкой, а не широкой настройки на панель хемосенсорных сигналов (рис. 4 D , E , фильм 3). Из 65 зарегистрированных EGC, 41 (63,0%) активировался только натуралистической стимуляцией, но не сульфатированными стероидами. Только 24 (37,0%) из 65 ЭГК Cort ⁺ вообще реагировали на сульфатированные стероиды, и только 4 (6.2%) зарегистрированных клеток, активированных исключительно сульфатированными стероидами (рис. 4 D , E ). Эта небольшая популяция клеток демонстрировала широкую настройку сульфатированных стероидов, но также показывала флуоресценцию и спонтанную активность выше нормы, возможно, предполагая, что эти клетки могли быть нездоровыми (или, возможно, принадлежать к редкому подтипу клеток Cort ⁺ ). Эти эксперименты показали, что EGC Cort ⁺ обладают уникальными свойствами, которые поддерживают низкую базальную флуоресценцию GCaMP6f, и показали, что EGC редко настраиваются на химические сигналы.Этот результат противоречил нашей гипотезе о том, что EGC, такие как интернейроны PV-EPL в MOB, будут настраиваться более широко, чем их входы MC в восходящем направлении.

Сравнение хемосенсорных настроек MC, JGC и EGC

Для более непосредственного изучения специфической для типа клетки настройки в AOB мы оценили широту настройки на все стимулы и мономолекулярные стероиды во всех изученных типах клеток (см. «Материалы и методы»). »; Рис. 5). Распределение эффективных стимулов с (рис. 5 A ) или без (рис.5 B ) натуралистических стимулов на клетку показали, что MC продемонстрировали самую широкую настройку на эту панель хемосенсорных сигналов, при этом 103 из 266 (38,7%) реагировали не менее чем на четыре стимула (рис. 5 A ) и 125 из 266 (47,0%) реагируют не менее чем на три сульфатированных стероида. Напротив, большинство EGC (47 из 65; 72,3%) реагировали на два или меньше стимулов, а 41 из 65 (43,1%) не реагировали на какие-либо тестируемые сульфатированные стероиды. Gad2 ⁺ JGC продемонстрировали промежуточную настройку как с натуралистическими стимулами, так и без них.Широта настройки MC согласуется с гетеротипической интеграцией входов VNO MC AOB (Wagner et al., 2006; Meeks et al., 2010). Когда были включены смеси природных лигандов, совокупные распределения эффективных стимулов показали значительные различия в настройке между каждым типом интернейронов и MC (EGC vs JGC, p = 0,37; EGC vs MC, p = 1,5e-4; JGC vs MC , p = 4.9e-5; критерий Колмогорова – Смирнова; рис. 5 B , слева). При исключении натуралистических стимулов (рис.5 B , справа), эти эффекты были еще более выраженными (EGC vs JGC, p = 0,063; EGC vs MC, p = 6,1e-7; JGC vs MC, p = 3,3e-5 ; Тест Колмогорова – Смирнова). EGC, JGC и MC имеют сходные паттерны распределения по мономолекулярным стероидным стимулам (Рис. 5 C ). Например, A6940, P3817, Q1570 и Q3910 активировали наибольшее количество нейронов во всех трех популяциях клеток, тогда как A7010, E0893, E1050 и E4105 активировали наименьшее количество нейронов.В целом, паттерны настройки, наблюдаемые для мономолекулярных сульфатированных стероидов во всех типах клеток, соответствовали предыдущим исследованиям (Meeks et al., 2010; Turaga and Holy, 2012; Hammen et al., 2014).

Рисунок 5.

A , слева, гистограммы количества эффективных стимулов для EGC, JGC и MC. Заштрихованные области указывают плотности ядер по Гауссу. Справа тройные звездочки указывают на статистически значимые различия между группами (EGC vs MC, p = 1.5e-4; EGC против JGC, p = 0,37; MC vs JGC, p = 4.9e-5, тест K-S) B , то же самое, что и в A , за исключением стимулов разбавленной мочи и кала. Тройные звездочки указывают на статистически значимые различия между группами (EGC vs MC, p = 6,1e-7; JGC vs MC, p = 3,3e-5; EGC vs JGC, p = 0,063, тест K-S). C , Процент EGC, JGC и MC, которые ответили на каждый стимул в панели.

Ответы JGC и EGC на смеси природных лигандов были чрезмерно представлены по сравнению с MC (Фиг.2 C , 3 C , 4 E ). В частности, 63% EGC (фиг. 4 E ) и 44,3% JGC (фиг. 3 C ) реагировали исключительно на смеси природных лигандов по сравнению с 25,2% для MC (фиг. 2 C ). И наоборот, 9% MC активируются исключительно сульфатированными стероидами, по сравнению с 6,2% EGC и 2,5% JGC. Эти различия в доле отзывчивых нейронов могут отражать сложные сетевые эффекты.Однако они могут более просто отражать различия в порогах активации; предыдущие исследования показали, что MC имеют более высокое отношение сигнал / шум и более низкие эффективные пороги активации, чем их входы VSN (Meeks et al., 2010).

EGC и MC демонстрируют сходные отношения GCaMP6f к пикам во время моделирования сенсорной активности.

Наблюдение, что хемосенсорная настройка EGCs намного реже, чем MC, противоречило нашей первоначальной гипотезе. Одним из возможных объяснений этого наблюдения является то, что сигналы EGC GCaMP6f более слабо отражают пиковую активность в EGC по сравнению с MC.Чтобы изучить взаимосвязь GCaMP6f-spiking, мы сначала выполнили двухфотонную регистрацию патч-клампа целых клеток на EGC и MC, одновременно записывая их сигналы GCaMP6f в острых срезах головного мозга. Сначала мы обнаружили, что мембранные потенциалы покоя в EGC (-86,0 ± 1,0 мВ; N = 22) были значительно гиперполяризованы по сравнению с таковыми в MC (-63,7 ± 1,0 мВ; n = 18), подтверждая более ранние результаты (Gorin et al. др., 2016; Максимова и др., 2019).

Мы исследовали ответы GCaMP6f на импульсную стимуляцию как в режиме фиксации тока, так и в режиме фиксации напряжения (рис.6 A – D ). В токовых зажимах EGC и MC достигли сопоставимых пиковых значений ΔF / F в течение 10 с, 20 Гц соматических последовательностей импульсов (рис. 6 B ). Как в режиме фиксации напряжения, так и в режиме токового зажима, MC показали более высокую динамику роста, чем EGC (Рис. 6 B ). При фиксации напряжения большинство MC (20 из 22) показали сигмоидальную зависимость ΔF / F от стимула-ответа (фильм 4), тогда как многие EGC (6 из 17) вообще не смогли достичь плато (рис. 6 B , Movie 5).

Рисунок 6.

A , Схема установки патч-зажима для целых клеток. B , Пример ответа флуоресценции GCaMP6f на искусственную подачу тока в токовые клещи (I-Clamp, слева) и напряжения (V-Clamp, справа). C , Пример ответа EGC и MC в ответ на шаги впрыска тока. D , слева, соотношение ΔF / F-число всплесков при возбуждении ∼10 Гц. Тройные звездочки указывают на статистическую значимость ( p = 5.06e-36, основной эффект типа клетки; двусторонний дисперсионный анализ ANOVA). Справа, скорость стрельбы EGC и MC.n.s .: статистически недостоверно (критерий Стьюдента t , p = 0,35). E , Схема записи прикрепленных клеток с неплотным закрытием и стимуляции гломерулярного слоя. Estim, стимулирующий электрод из стекла Theta; Erecord, записывающий электрод со свободным уплотнением. F , Примеры записывающих следов с прикрепленными неплотно закрытыми клетками от двух EGC и двух MC показывают явное усиление флуоресценции после одиночных спонтанных всплесков. G , Пример вызвал следы флуоресценции EGC и MC.Черная полоса указывает на окно стимуляции. На вставках — увеличенные изображения первых ∼0.25 с после начала стимуляции. H , ΔF / F на 3-м и 10-м кадрах сразу после начала пика 1, нанесенный на график в зависимости от количества пиков, произошедших в этом временном окне. Тройные звездочки указывают на статистическую значимость; n.s. указывает на отсутствие статистической значимости (3 кадра, p = 0,65; 10 кадров, p = 2,04e-6, основной эффект типа клетки, двухфакторный дисперсионный анализ). I , слева, отношение ΔF / F к пикам, измеренное с помощью записи с прикрепленными ячейками с неплотным уплотнением. Двойная звездочка указывает на статистическую значимость ( p = 4,1e-3, основной эффект типа клетки, двусторонний дисперсионный анализ ANOVA). Справа: количество потенциалов действия, необходимое для прохождения ΔF / F = 0,1 (тест Стьюдента t , p = 0,91) и ΔF / F = 0,3 (тест Стьюдента t , p = 0,66). n.s указывает на отсутствие статистической значимости.

Мы дополнительно протестировали работу GCaMP6f с вводом ступенчатого тока в режиме фиксации тока.Стандартизованные линейные изменения тока вызвали сопоставимые максимальные частоты всплесков в EGC (27 ± 1,53 Гц, N = 6) и MC (25 ± 3,70 Гц, N = 4; рис. 6 C ). Мы измерили изменения интенсивности GCaMP6f во время ввода ступенчатого тока, которые вызвали срабатывание ∼10 Гц в течение 10 с (MC: 9,64 ± 0,131 Гц, N = 4; EGC: 10,07 ± 0,256 Гц, N = 6; p = 0.11, тест Стьюдента t ; рис.6 D ). В этих условиях оба типа клеток достигли одинаково высокого пика ΔF / F (MC, 3.68 ± 0,267; EGC, 3,27 ± 0,692; Тест Стьюдента t , p = 0,63). Анализ отношения GCaMP6f к пикам для первых 20 пиков в этих испытаниях показал, что и MC, и EGC показали почти линейное соотношение ΔF / F (фиг. 6 D ). Однако MC продемонстрировали более быстрое увеличение ΔF / F, о чем свидетельствует значительно больший наклон GCaMP6f к спайку в MC по сравнению с EGC ( p = 5.06e ^-36 , основной эффект типа клеток; p = 9.79e ⁻¹² , взаимодействие типа клетки и числа спайков, двусторонний дисперсионный анализ). Таким образом, подходы на основе цельноклеточного патч-зажима показали более устойчивую эффективность GCaMP6f-to-spiking в MC, чем в EGC.

Подходы, основанные на патч-зажиме, для оценки взаимосвязи GCaMP6f-пиковой нагрузки широко распространены (Dana et al., 2019; Inoue et al., 2019; Wei et al., 2019), но имеют несколько важных оговорок. Например, цельноклеточный патч-зажим разрушает буферную среду цитоплазмы Ca ²⁺ . Более того, стимуляция пикового импульса через соматический патч-зажимный электрод не активирует эти клетки посредством естественного прогрессирования синаптического возбуждения, испытанного in vivo (или препаратом ex vivo ).Чтобы оценить эффективность GCaMP6f во время более естественных волн синаптической активации, мы выполнили одновременную визуализацию GCaMP6f Ca ²⁺ и записи прикрепленных к клеткам неплотно закрытых клеток при электрической стимуляции клубочкового слоя AOB (EGC, N = 8; MC, N = 12; фильмы 6, 7, рис. 6 ( E ). В этих записях и MC, и EGC иногда срабатывают спонтанно, вызывая четкие ответы GCaMP6f (Fig. 6 F ). Когда применялась стимуляция гломерулярного слоя, мы регистрировали вызванные стимулом поезда потенциала действия в MC и EGC эквивалентных частот (MC: 8.76 ± 1,87 Гц, N = 12; EGC: 12,63 ± 3,50 Гц; N = 8). В отличие от экспериментов с патч-зажимом для целых клеток, эти записи показали быстрое увеличение GCaMP6f в обоих типах клеток (фиг. 6 G ). Мы проанализировали ответ GCaMP6f после начального спайка, вызванного стимулом, построив график достигнутой амплитуды GCaMP6f в зависимости от количества спайков в фиксированном окне после спайка 1. Мы оценили ответы GCaMP6f на 3 кадрах (от ~ 100 до 132 мс) и 10 кадрах (~ 333 — 365 мс), чтобы показать кратковременное и долгосрочное развитие вызванного сигнала (рис.6 H ). В трех кадрах EGC и MC не показали разницы (EGC, 19 испытаний с 8 клетками; MC, 37 испытаний с 12 клетками; p = 0,65, основной эффект типа клетки; p = 0,90, тип клеток — число спайков. взаимодействие, двусторонний дисперсионный анализ). В пределах 10 кадров EGCs начали развивать более сильный кумулятивный эффект, чем MC (EGC, 18 испытаний 7 клеток; MC, 36 испытаний 12 клеток; p = 2,04e ⁻⁶ , основной эффект типа клеток; p = 2,1e ⁻¹² , взаимодействие типа клетки и числа спайков, двусторонний дисперсионный анализ).Связь между первыми 20 спайками и ΔF / F дала аналогичные результаты ( p = 4,1e ⁻³ , основной эффект типа клетки; p = 0,99, взаимодействие типа клетки и числа спайков, двусторонний дисперсионный анализ ANOVA) . И MC, и EGC достигли 30% критерия ΔF / F, используемого для определения реактивности в экспериментах по визуализации ex vivo (рис. 2–5) примерно после четырех всплесков (рис. 6 H ; EGC: 4,13 ± 0,52, ). N = 8; MC: 3,83 ± 0,39, N = 12; p = 0.66, критерий Стьюдента t ) и критерий 10% ΔF / F только после примерно двух всплесков (EGC: 1,88 ± 0,23, N = 8; MC: 1,92 ± 0,26, N = 12; p = 0,91, тест Стьюдента t ). Таким образом, эти эксперименты показывают, что EGCs и MCs, несмотря на явные различия в характеристиках GCaMP6f-to-spiking в цельноклеточной конфигурации patch-clip, демонстрируют сходные ответы GCaMP6f на выбросы, когда задействована цепь AOB. Таким образом, эти данные предполагают, что различия в производительности GCaMP6f между MC и EGC не могут объяснить разреженность настройки, которую мы наблюдали в EGC в препаратах ex vivo (рис.2–5).

Ex vivo Записи целых клеток EGC показывают широкую подпороговую чувствительность

Измерение взаимосвязей между пиками и ΔF / F в MC и EGC не учитывает разреженность наблюдаемой настройки EGC. Более того, оценки ΔF / F для пиков были сделаны с использованием протоколов искусственных пиков, которые могут не отражать условия пиков в экспериментах ex vivo по настройке химиосенсоров. Другим возможным объяснением разреженности настройки EGC может быть сильно гиперполяризованный потенциал мембраны покоя EGC, который, как показали наши данные и предыдущие исследования, составляет от ~ 15 до 20 мВ гиперполяризован по сравнению с другими нейронами AOB (Максимова и др., 2019). Эта экстремальная гиперполяризация в состоянии покоя может предотвратить всплески EGC при любых условиях стимуляции, кроме самых сильных, потенциально препятствуя наблюдению устойчивых сигналов GCaMP6f. Поэтому мы выполнили 2-фотонную флуоресценцию под контролем патч-кламп-записи целых клеток на EGC Cort ⁺ в препарате ex vivo (рис. 7). Мы провели эти эксперименты на Cort- T2A-Cre мышах, скрещенных с cre-зависимой репортерной линией tdTomato (Madisen et al., 2010), что улучшило нашу способность идентифицировать сомы EGC в состоянии покоя.Используя методы, аналогичные тем, что использовались в исследовании Häusser and Margrie (2014), мы достигли конфигурации всей ячейки, а затем поддерживали каждую ячейку в токовом зажиме около ее начального потенциала покоя с помощью подачи постоянного тока. Потенциалы покоя мембраны EGC в препаратах ex vivo , измеренные сразу после взлома, были деполяризованы по сравнению с срезами АОБ (-63,7 ± 2,0 мВ, n = 18). Причины расхождения не были ясны, учитывая, что внутренние и внешние решения были идентичны таковым в экспериментах на срезах.Тем не менее, мы решили поддерживать исправленные EGC при этих относительно деполяризованных потенциалах, потому что они, скорее всего, отражали состояние EGC в этом препарате ex vivo (т.е. во время экспериментов по визуализации GCaMP6f; рис. 2, 4). Важно отметить, что наблюдение, что EGCs имеют относительно деполяризованные мембранные потенциалы покоя в препарате ex vivo , предполагает, что, во всяком случае, EGCs в этом препарате могут быть намного ближе к порогу потенциала действия, чем предполагалось на основании потенциалов покоя, измеренных в экспериментах на срезах.

Рисунок 7.

A , Следы среднего напряжения примера EGC в препарате ex vivo во время стимуляции VNO. Активности подпороговых реакций увеличены на вставках. Q1570, Q3910 и P8168 надежно вызывают подпороговые EPSP. Экстракты мочи и кала вызывают потенциалы действия. B , Тепловая карта средних изменений напряжения 18 зарегистрированных EGC. C , Тепловая карта пиковых ответов тех же 18 EGC. D , Сравнение чувствительности, измеренной с помощью визуализации Ca ²⁺ и патч-зажима. E , Модель пороговой интеграции подключения MC – EGC.

Мы записали ответы EGC, пока мы стимулировали VNO с той же панелью химических сигналов, которая использовалась в наших записях GCaMP6f (рис. 7). В соответствии с нашими результатами GCaMP6f, потенциалы действия надежно запускались в EGCs после стимуляции VNO смесями естественных лигандов (разбавленная моча или кал мыши), но редко какими-либо мономолекулярными лигандами в панели стимуляции (рис.7 А ). Пиковые реакции на периферическую стимуляцию обычно включали импульсную стрельбу в начале предъявления стимула (11,90 ± 2,56 Гц, n = 20) с последующим длительным подпороговым периодом затухания, который выходил далеко за пределы окна стимуляции (в среднем 90-10% затухания). время 9,70 ± 0,44 с; n = 76 пар клетка – стимуляция). Кинетика затухания деполяризации сравнима для натуралистических стимулов (среднее время распада 90-10%, 10,26 ± 0,49 с; n = 31 пара клетка-стимуляция) и мономолекулярных лигандов (среднее время затухания 90-10%, 9.30 ± 0,65 с; n = 45 пар клетка – стимуляция). Важно отметить, что мы легко наблюдали широкие подпороговые ответы на многие мономолекулярные стероидные лиганды (рис. 7 A ). Эти подпороговые ответы были тесно связаны с началом стимуляции и были надежными в повторных испытаниях (рис. 7 A ). Общий диапазон деполяризации соответствовал динамике активации активности MC GCaMP6f (рис. 1, 2; среднее время распада 90–10%, 8,09 ± 0,06 с; n = 978 пар клетка – стимуляция) и предыдущим исследования (Wagner et al., 2006; Хендриксон и др., 2008; Микс и др., 2010; Йолес-Френкель и др., 2018).

Исследование паттернов подпороговой чувствительности EGC выявило гораздо более широкую интеграцию MC, чем было показано в экспериментах по визуализации GCaMP6f. Из 18 чувствительных EGC 13 показали только подпороговую активность без пиков стимуляции VNO мономолекулярными сульфатированными стероидами (фиг. 7 B ; p <0,05 по сравнению с контролем-носителем, критерий суммы рангов Вилкоксона). Сравнение суммарной подпороговой и надпороговой настройки с надпороговой настройкой в ​​этой группе исправленных ячеек выявило основной источник несоответствия между MC и EGC (рис.7 B , C ). Например, 4 из 18 зарегистрированных клеток, несмотря на четкие подпороговые ответы на эти стимулы, вообще не имели всплесков. Из 14 клеток, которые стимулировались в ответ на эти стимулы, большинство (9 из 14) увеличивалось только в ответ на смеси натуральных лигандов, что согласуется с результатами, основанными на GCaMP6f (фиг. 4 D ). Когда мы включили подпороговую активацию в наши критерии, распределение чувствительности EGC было значительно смещено вправо (шире), чем распределение EGC, определенное с помощью визуализирующего сигнала GCaMP6f ( p = 2.2e-4, критерий Колмогорова – Смирнова) и стал статистически неотличим от МК ( p = 0,21, критерий Колмогорова – Смирнова; рис. 7 D ). Эти результаты помогают объяснить наши визуализационные наблюдения ex vivo Ca ²⁺ и подтверждают гипотезу, что EGCs широко интегрируются из MCs (Fig. 7 E ). Однако эти данные также показывают, что EGC Cort ⁺ эффективно стимулируются к спайку только стимулами, которые вызывают спайки в большом количестве митральных клеток AOB (в этой панели стимулов разбавленная моча и фекалии мышей).В совокупности эти результаты предполагают, что AOB EGCs выполняют принципиально разные роли в AOB, чем интернейроны PV-EPL в MOB. Хотя эти клетки являются широкими интеграторами, они редко настраиваются на уровне пиков, предполагая, что их активность стимулируется только в условиях, в которых одновременно активируется большой ансамбль MC.

Обсуждение

Типовые функциональные исследования клеток в препарате AOB

ex vivo

Наши знания о функции интернейронов в AOB, как правило, отсутствуют из-за постоянных технических проблем с записью данных с этих нейронов во время стимуляции VNO.Препарат ex vivo ранней мышиной AOS, который обеспечивает оптический доступ к AOB при сохранении функциональной связи VNO-AOB, преодолевает некоторые из основных препятствий на пути проведения исследований хемосенсорной настройки, специфичных для типов клеток. Однако результаты исследований ex vivo имеют некоторые ограничения. Например, препарат ex vivo устраняет влияние потенциальной нейромодуляции обратной связи из нижележащих областей мозга, что, несомненно, важно для функции цепи АОБ (Oboti et al., 2018). Несмотря на это существенное ограничение, устраняя некоторые сложности in vivo , подход ex vivo имеет явные преимущества для анализа базовой структуры и функции цепи АОБ.

Объединив методы ex vivo с 2-фотонной микроскопией и генетическими инструментами для манипуляций, специфичных для типов клеток в нервной системе, мы смогли провести целенаправленные исследования химиосенсорной настройки в генетически определенных подмножествах интернейронов АОБ. Конкретные типы клеток, исследованные в этом исследовании, а именно MC, JGC и EGC, представляют три из четырех основных классов нейронов (оставшимся основным классом являются IGC).Наш подход позволил нам произвести количественные сравнения характеристик стимула-ответа каждого типа клеток и сделать это в нескольких рандомизированных испытаниях стимулов, чтобы уменьшить возможное влияние спонтанной активности (Holy et al., 2000; Nodari et al., 2008). ; Meeks et al., 2010). Таким образом, польза этой комбинации методов для изучения функции цепи AOB очевидна, и результаты этих экспериментов позволили нам выявить ключевые различия в функции EGC AOB по сравнению с внешне похожими интернейронами PV-EPL в MOB (Kato et al., 2013; Miyamichi et al., 2013).

ЭГК АОБ широко иннервируются, но редко настраиваются на хемосенсорные стимулы

МК АОБ способны интегрировать возбуждающий сигнал от VSN, которые экспрессируют различные сенсорные вомероназальные рецепторы (Wagner et al., 2006), и в целом настроены на сенсорный ввод (Meeks et al. др., 2010). Таким образом, ожидалось наблюдение большого количества настраиваемого разнообразия MC как на натуралистическую стимуляцию, так и на хорошо охарактеризованную панель мономолекулярных сульфатированных стероидов (рис. 2).Широкие и вариативные паттерны настройки MC добавляют к растущему списку исследований, показывающих, что эти клетки поддерживают кодирование идентичности животного, излучающего хемосигналы (Luo et al., 2003; Hendrickson et al., 2008; Ben-Shaul et al. др., 2010; Толох и др., 2013). Высокая степень активации MC мономолекулярными сульфатированными стероидными лигандами в этой панели также поддерживает идею о том, что эти клетки обладают более высокой устойчивостью кодирования, чем их входы VSN, что характерно для основных нейронов в других сенсорных цепях и видах (Bhandawat et al., 2007; Микс и др., 2010; Чжу и др., 2013).

Наша априорная гипотеза заключалась в том, что AOB EGCs были функционально аналогичны интернейронам MOB PV-EPL, поэтому мы были удивлены, когда мы наблюдали значительно более редкую хемосенсорную настройку EGCs по сравнению с их входами MCs выше по течению. В то время как многие EGC были надежно активированы мочой или фекальными экстрактами самок мышей BALB / c, лишь немногие из них проявили чувствительность к мономолекулярным лигандам (рис. 4). Этот результат был противоречивым, учитывая, что EGCs имеют обширные остистые дендритные разветвления в ECL и получают постоянный шквал сильного глутаматергического возбуждения от MC даже в отсутствие активации VSN (Максимова и др., 2019). Мы исследовали, может ли дифференциальная передача сигналов GCaMP6f в EGCs и MC вносить вклад в это наблюдение. Для этого мы использовали патч-зажим целых клеток и запись с прикрепленными ячейками (рис. 6). Хотя расхождения в эффективности отчетности GCaMP6f наблюдались в конфигурации цельноклеточного патч-зажима, записи неплотного закрытия во время стимуляции клубочкового слоя, которые более точно имитируют естественную стимуляцию АОБ, не показали различий между этими типами клеток (рис. 6 E – I). ).Наши результаты показывают, что наши критерии отзывчивости достигаются с 2 или более спайками в MC и EGC (рис. 6 G — I ). Таким образом, этот подход должен обеспечивать низкий уровень ложноотрицательных результатов, но стоит отметить, что одиночные спайковые ответы (как в MC, так и в EGC) могли не быть обнаружены. Эти результаты предоставляют важные доказательства того, что различия в сигналах GCaMP6f между AOB MCs и EGCs не могут объяснить наблюдаемую разреженность настройки в EGCs.

ЭГК ранее были отмечены как имеющие чрезвычайно гиперполяризованные мембранные потенциалы покоя (Максимова и др., 2019), что предполагает, что EGC могут обладать очень высокими порогами для генерации потенциала действия из состояний покоя. Исследования EGC на целых клетках в препарате ex vivo показали, что, несмотря на использование тех же внутренних и внешних растворов, что и в экспериментах на срезах, мембранные потенциалы покоя EGC были более деполяризованы в препарате ex vivo , чем в срезах. Это могло быть результатом неполной перфузии относительно низкого [K ⁺ ] _o в aCSF (2.5 мм), или, возможно, из-за общего более высокого возбуждающего тонуса в этом препарате (или обоих). Важно отметить, что эти измерения мембранного потенциала покоя были выполнены в тех же условиях, в которых были выполнены измерения хемосенсорной настройки EGC GCaMP6f, что позволяет предположить, что гиперполяризация EGC в состоянии покоя оказывает менее сильное влияние на разреженность настройки, чем ожидалось на основе результатов среза. В записях ex vivo целых клеток мы наблюдали богатую подпороговую активность, вызванную сульфатированными стероидами, но небольшие всплески, за исключением реакции на стимуляцию мочой или фекалиями (рис.7). Таким образом, несмотря на умеренно деполяризованные мембранные потенциалы покоя в препарате ex vivo , EGC демонстрируют устойчивость к генерации потенциала действия, если одновременно не активен очень большой ансамбль MC (как в случае, когда VNO стимулируется мочой и фекалиями мышей). Физиологические механизмы, которые могут вносить вклад в высокие пороги EGC для пиков, могут включать избирательную экспрессию каналов утечки на дендритах EGC и ингибирование шунтирования др. Интернейронами (Chamberland and Topolnik, 2012).Для выяснения источника высоких пороговых значений выбросов EGC потребуются дальнейшие исследования.

Стоит также отметить, что, хотя трансгенные мыши Cort- T2A-cre, использованные в этих исследованиях, избирательно маркируют EGC AOB, популяция EGC Cort ⁺ , вероятно, представляет собой долю от общей популяции EGC (Максимова и др., 2019). Таким образом, возможно, что наблюдаемая нами хемосенсорная настройка представляет собой конкретную подгруппу EGC Cort ⁺ . Это кажется маловероятным, учитывая, что не было обнаружено различий между морфологией EGC, внутренними особенностями и синаптическими особенностями нескольких трансгенных линий, которые маркируют эти клетки (Максимова и др., 2019). Кроме того, хотя маркировка Cort ⁺ EGC охватывает передние и задние АОБ, наши оптические записи в основном ограничивались частями переднего АОБ, где реакция на сигналы в нашей панели наиболее заметна (Meeks et al., 2010; Doyle et al. ., 2014). Таким образом, может случиться так, что EGC в заднем АОБ имеют другие параметры настройки, чем указано в этом исследовании.

Значение для моделей обработки информации AOB

Сложные физиологические свойства EGC и их хемосенсорная настройка становятся более ясными, но влияние активации EGC на функцию MC остается неясным.Многие EGC помечены в трансгенных линиях Gad2 -IRES-cre (Максимова и др., 2019), что соответствует ГАМКергическому фенотипу. EGC не имеют аксонов и имеют остистые дендриты, которые близко соприкасаются с дендритами MC, а MC AOB, как известно, образуют реципрокные дендродендритные синапсы с другими интернейронами AOB (Jia et al., 1999; Taniguchi and Kaba, 2001; Castro et al., 2007; Larriva- Sahd, 2008). На первый взгляд аналогичные интернейроны PV-EPL в MOB обладают широким ингибирующим действием (Kato et al., 2013; Miyamichi et al., 2013; Лю и др., 2019). Все эти свидетельства указывают на взаимную ингибирующую функцию для EGC, и будущие исследования смогут дополнительно прояснить влияние EGC на функцию MC и информационный поток через AOB.

Независимо от механизмов, лежащих в основе специфических хемосенсорных свойств настройки EGCs, наблюдение, что EGCs редко всплескивают в отсутствие смеси натуралистических лигандов, имеет важные последствия для функции цепи AOB. Во-первых, эти результаты предполагают, что EGCs выполняют уникальные роли в обработке AOB, которые отличаются от интернейронов PV-EPL в MOB.Это не первое наблюдение кажущихся аналогичными нейронных типов в MOB и AOB, обладающих разными физиологическими свойствами (Shipley, Adamek, 1984; Jia et al., 1999; Araneda, Firestein, 2006; Wagner et al., 2006; Castro et al. ., 2007; Смит и др., 2015). В MOB интернейроны PV-EPL активируются многими мономолекулярными одорантами с низкими порогами, что приводит к настройке хемосенсоров, которая близка к простому линейному добавлению карт настройки входных MCs (Kato et al., 2013). Это качество способствует объективному мониторингу активности MC и поддерживает разделительную нормализацию MC на основе общей реакции населения (Kato et al., 2013; Miyamichi et al., 2013; Лю и др., 2019). Напротив, AOB EGCs, по-видимому, обладают чрезвычайно высокими эффективными порогами, несмотря на получение синаптических входных сигналов от многих MCs, которые могут сильно отклонять их активность от мономолекулярных лигандов в сторону смесей лигандов, обнаруживаемых в естественных выделениях (Nodari et al., 2008). Поскольку известно, что естественные вомероназальные социальные сигналы существуют только в форме таких сложных смесей, разница в разреженности мономолекулярной настройки между AOB EGCs и MOB PV-EPL интернейронами может отражать макроскопические различия в естественной статистике отбора лигандов между этими двумя хемосенсорными путями.Также возможно, что ингибирование MC с помощью EGC происходит локально в реципрокных дендродендритных синапсах независимо от пиков, как это наблюдалось в MOB (Isaacson and Strowbridge, 1998; Schoppa et al., 1998; Chen et al. , 2000; Halabisky et al., 2000; Isaacson, 2001; Egger et al., 2005; Huang et al., 2013; Bywalez et al., 2015; Lage-Rupprecht et al., 2018).

AOB EGCs, таким образом, по-видимому, действуют, как минимум, способом, который явно отличается от интернейронов PV-EPL в MOB, что вызывает вопросы об их роли in vivo в сенсорной обработке.В нескольких исследованиях сообщалось об отдельных вомероназальных лигандах, способных вызывать значительные поведенческие эффекты через AOS (Chamero et al., 2007; Haga et al., 2010; Papes et al., 2010). Если наши результаты справедливы для других лигандов AOS, маловероятно, что эти конкретные хемосенсорные воздействия задействуют EGC, что может иметь важные последствия для потока информации через AOB к его нижележащим целям в лимбической системе (Martinez-Marcos, 2009; Gutiérrez-Castellanos et al. др., 2014; Stowers, Liberles, 2016).В общем, эти эксперименты предоставляют обширную информацию о хемосенсорной настройке определенных типов клеток АОБ, добавляя важные количественные ограничения на роль ингибирующих интернейронов в функции цепи АОБ.

Парадоксально редкая настройка хемосенсоров при широкой интеграции внешних гранулярных клеток в обонятельную лампу для мыши

Рисунок 6.

A , ​​Схема установки патч-зажима для всей клетки. B , ​​Пример флуоресценции GCaMP6f…

Рисунок 6.

A , ​​Схема установки патч-зажима для всей клетки. B , ​​Пример ответа флуоресценции GCaMP6f на искусственную подачу тока в токовые клещи (I-Clamp, слева) и напряжения (V-Clamp, справа). C , ​​Пример реакции EGC и MC в ответ на шаги подачи тока. D , ​​слева, соотношение ΔF / F-число пиков при возбуждении ∼10 Гц.Тройные звездочки указывают на статистическую значимость ( p = 5.06e-36, основной эффект типа клетки; двусторонний дисперсионный анализ ANOVA). Справа, скорость стрельбы EGC и MC. n.s .: статистически не значимо (тест Стьюдента t , p = 0,35). E , ​​Схема записи прикрепленных клеток и стимуляции клубочкового слоя. Estim, стимулирующий электрод из стекла Theta; Erecord, записывающий электрод со свободным уплотнением. F , ​​Примеры записывающих следов с прикрепленными неплотно закрытыми клетками от двух EGC и двух MC показывают явное усиление флуоресценции после одиночных спонтанных всплесков. G , ​​Пример вызвал следы флуоресценции EGC и MC. Черная полоса указывает на окно стимуляции. На вставках — увеличенные изображения первых ∼0.25 с после начала стимуляции. H , ​​ΔF / F на 3 и 10 кадрах сразу после начала пика 1, нанесенный на график в зависимости от количества пиков, которые произошли в этом временном окне. Тройные звездочки указывают на статистическую значимость; n.s. указывает на отсутствие статистической значимости (3 кадра, p = 0.65; 10 кадров, p = 2,04e-6, основной эффект типа ячейки, двухфакторный дисперсионный анализ). I , ​​слева, отношение ΔF / F к пикам, измеренное с помощью записи с прикрепленными ячейками со свободным уплотнением. Двойная звездочка указывает на статистическую значимость ( p = 4,1e-3, основной эффект типа клетки, двусторонний дисперсионный анализ ANOVA). Справа: количество потенциалов действия, необходимое для прохождения ΔF / F = 0,1 (тест Стьюдента t , p = 0,91) и ΔF / F = 0,3 (тест Стьюдента t , p = 0.66). n.s указывает на отсутствие статистической значимости.

Настройка трансдермального транспорта путем приложения внешнего непрерывного электрического поля: крупномасштабное исследование молекулярной динамики

Контроль проницаемости кожи для определенных веществ (, например, , лекарств, витаминов и питательных веществ) через роговой слой является сложной задачей. Ионтофорез — это вариант, несмотря на отсутствие детального понимания лежащего в основе молекулярного механизма.В настоящей работе моделирование приложения внешнего непрерывного электрического поля к роговому слою в диапазоне низкой интенсивности (0–24 мВ нм ^-1 ) проводилось с использованием крупнозернистого молекулярного динамический подход. Используя набор случайных копий исходной конфигурации, мы наблюдали, что в диапазоне напряженности электрического поля 22–23 мВ нм ^-1 в 20% случаев образовывались богатые водой липидные везикулы.В остальных 80% появились поры. Мы утверждаем, что липиды претерпевают быструю переориентацию под действием электрического поля, вызывая механическую нестабильность, которая порождает поры. Мы представили простую электростатическую модель для интерпретации результатов, в которых несоответствие между электрическими проницаемостями мембраны и внешней среды и градиентом локального электрического поля на поверхности мембраны, определяют временные масштабы и электрические поля для образования пузырьков. Наши результаты показывают, что разница между электрическими проницаемостями мембраны и внешней среды всего на 10% снижает на 1/6 минимальное время, необходимое для образования пузырьков.Требуемое минимальное электрическое поле уменьшается в 10 раз. Контроль и регулировка образования биологически совместимых везикул, способных переносить вещества под действием электрических полей низкой интенсивности, имеет многообещающее применение в таких областях, как лекарственная терапия и дермокосметика, позволяя использовать гидрофильные вещества в кожных покровах.

У вас есть доступ к этой статье

Подождите, пока мы загрузим ваш контент.