LPKh0127 Патрубок ВАЗ-2170-2173 отопителя комплект Luzar — LPKh0127
LPKh0127 Патрубок ВАЗ-2170-2173 отопителя комплект Luzar — LPKh0127 — фото, цена, описание, применимость. Купить в интернет-магазине AvtoAll.Ru
Распечатать
Применяется: LADA, ВАЗ
Артикул:
LPKh0127
Код для заказа: 303740
Только самовывоз
Код для заказа
303740
Артикулы
LPKh0127
Производитель
LUZAR
Материал
EPDM (Этилен-пропиленовый каучук)
Количество
2
Оснащение / оборудование
для транспортных средств с/без кондиционером
Вид коробки передач
механическая коробка передач
Статьи о товаре
-
«Хрустальные» ВАЗы: «Восьмёрка», Калина, Приора26 Марта 2013
Серия статей ««Хрустальные» ВАЗы, или типичные поломки отечественных автомобилей» рассказывает о характерных проблемах и неполадках машин, выпускаемых Волжским автомобильным заводом. Сегодня мы поговорим о переднеприводном семействе «Самара», а также его современных аналогах.
Наличие товара на складах и в магазинах, а также цена товара указана на 14.08.2021 23:30.
Цены и наличие товара во всех магазинах и складах обновляются 1 раз в час.
При достаточном количестве товара в нужном вам магазине вы можете купить его без предзаказа.
Интернет-цена — действительна при заказе на сайте или через оператора call-центра по телефону
8-800-600-69-66. При условии достаточного количества товара в момент заказа.
Цена в магазинах — розничная цена товара в торговых залах магазинов без предварительного заказа.
Срок перемещения товара с удаленного склада на склад интернет-магазина.
Представленные данные о запчастях на этой странице несут исключительно информационный характер.
cb9f66f5ad3eacb7024f21dbaee31c5c
Добавление в корзину
Код для заказа:
Доступно для заказа:
Кратность для заказа:
Добавить
Отменить
Товар успешно добавлен в корзину
!
В вашей корзине
на сумму
Закрыть
Оформить заказ
дилер LADA в г. Москва
Лидеры российского рынка автострахования совместно с АВТОВАЗом запустили массовые программы доступно
«Ингосстрах», «АльфаСтрахование», «Согласие», «Росгосстрах» и «ВСК» запустили специальные программы «умного» страхования (основанное на данных о фактическом использовании или UBI) для автомобилей LADA, подключенных к телематической платформе LADA Connect. Проект направлен на развитие рынка добровольного страхования автомобилей массового сегмента. Первым участником программы станет самый продаваемый в России автомобиль – LADA Granta.Новые массовые программы UBI сделают страхование существенно доступнее. При покупке автомобилей, оснащенных LADA Connect, единоразовая дополнительная скидка на полис КАСКО составит 10%. Кроме того, владельцы «подключенных» автомобилей смогут получать дополнительную скидку при продлении договора страхования до 30% в зависимости от качества вождения (скоринг вождения выполняется автоматически на основе данных телематики LADA Connect).Оливье Морне, вице-президент по продажам и маркетингу марки LADA: «LADA Connect – это новый уровень сервиса и комфорта для наших клиентов. Интеграция технологий Connected Car на этапе производства выполняет еще и важную социальную функцию, повышая доступность добровольного страхования. «Умное» страхование позволяет заметно снизить стоимость полиса. До этого момента его развитие, особенно в массовом сегменте, осложнялось тем, что затраты на установку оборудования могли себе позволить не все автовладельцы и страховые компании. Мы решили данную проблему на системном уровне».Автомобили Granta, оснащенные LADA Connect, уже доступны к заказу в Москве и Московской области, Санкт-Петербурге, Самарской области, Татарстане и в Пермском крае, а в ближайшие месяцы – по всей официальной дилерской сети.Работа LADA Connect основана на техническом решении компании «Лаборатория умного вождения», часть которого – телематическая платформа со специальной системой страхового скоринга обрабатывает данные о вождении и с согласия автомобилиста передает их страховым компаниям. На основе этих данных формируются индивидуальные предложения.Директор по развитию ООО «Лаборатория Умного Вождения» Тимур Кузеев: «Запуск LADA Granta, оснащенных LADA Connect, – эпохальное событие для страхового рынка России. Мы совместно с АВТОВАЗом и лидерами нашего страхового рынка проделали серьезную работу и создали уникальный для массового сегмента продукт, учитывающий лучшие международные практики и опыт, который в перспективе нескольких лет может вывести нашу страну в мировые лидеры по количеству программ UBI. Это значительно повысит инвестиционную привлекательность нашего рынка для глобального автобизнеса».Индивидуализация страховых тарифов выполняет ряд важных общественно значимых функций. По мнению участников рынка, распространение UBI-программ приведет к заметному повышению безопасности движения, сделает страховые продукты доступными для начинающих водителей, прививая им ответственный подход к использованию автомобиля, снизит уровень страхового мошенничества и обеспечит доступ к КАСКО в массовом сегменте, изменяя отношение к страхованию в обществе.Член правления ПАО «Росгосстрах» Елена Белоусенко: «Запуск UBI-программ для LADA Granta, оборудованных LADA Connect, приведет к повышению устойчивости и стимулирует развитие российского рынка автострахования. Индивидуализация скоринга по характеру вождения, позволяет персонализировать оценку. На практике это означает, что для клиента отпадет необходимость платить за чужие риски, и мы сможем предлагать более доступные тарифы, которые сделают КАСКО привлекательным продуктом в массовом сегменте. Мы рады быть участником такого масштабного проекта и считаем, что именно «умное» страхование – это ключевой фактор формирования массового устойчивого страхового рынка».При пролонгации скидка за аккуратное вождение будет суммироваться со стандартным страховым коэффициентом бонус-малус, что снизит стоимость полиса для аккуратных водителей до 50%. Такое снижение цен, как ожидают страховщики, позволит заметно повысить проникновение добровольного автострахования в нашей стране.Директор по маркетингу АО «РН-Банк» Алла Кибизова: «РН Банк, как оператор программ страхования для брендов Альянса, в который входит бренд LADA, видит своей миссией предоставление максимального уровня сервиса клиентам Альянса. Запуск «умного» страхования, с одной стороны, позволит клиентам LADA получать более выгодные условия по страхованию от крупнейших страховщиков, а c другой – выступит драйвером для дальнейшего развития технологий «умного» страхования на российском рынке. Мы видим запуск такого масштабного проекта примером успешной коллаборации крупнейших игроков автомобильного и страхового рынков с целью создать уникальный продукт с высокой клиентской ценностью».Платформа LADA Connect работает по принципу «черного ящика», собирая данные, которые помогают восстанавливать обстоятельства ДТП. Это упрощает и существенно ускоряет процедуру страхового урегулирования, позволяя для удобства автомобилистов частично автоматизировать бюрократические процедуры и переносить их в онлайн. Кроме того, за счет интеграции этой технологии у автовладельцев появится возможность урегулировать убытки без предоставления справок из компетентных органов по событиям, зафиксированным платформой LADA Connect.Заместитель генерального директора по розничному бизнесу СПАО «Ингосстрах» Алексей Власов: «Мы активно работаем с «умными» программами с 2015 года, но их доля в структуре нашего портфеля пока невелика. Причина в достаточно высоких операционных расходах на само оборудование, его установку и подписку на информационный обмен. При этом выгоды таких программ очевидны для нашей компании как в части сбора скоринговых данных и возможности контроля убытков, так и в части развития продуктового предложения «Ингосстраха». Мы крайне позитивно оцениваем внедрение Connected Car с телематическим функционалом от крупнейшего автопроизводителя в стране».Одним из преимуществ LADA Connect является пересекающаяся интеграция данных, которая создает единую экосистему коммуникации между партнерами и участниками проекта. Например, автовладелец сразу после оформления договора страхования сможет видеть условия страховой программы в мобильном приложении LADA Connect. Там же он сможет отслеживать свой текущий скоринговый балл для скидки на пролонгацию.Руководитель практики Affinity ООО «Страховой Брокер Виллис СНГ» Аррожейро Элдер Жорж Мартинью и Генеральный директор ООО «АСТ» (генеральный партнер Willis Towers Watson по розничному автострахованию в России) Каро Карапетян: «Оформление договоров страхования в дилерских центрах LADA реализуется через централизованную IT-систему выпуска полисов, разработанную партнером RCI Group (АО «РН-Банк» — банк Альянса Renault-Nissan-Mitsubishi) международным брокером Willis Towers Watson (NASDAQ: WLTW), внедренную и обслуживаемую совместно с ООО «АСТ». Это позволяет оптимизировать процесс работы со страховой документацией в одной системе, а также вести единую отчетность со страховщиками. Процесс полностью автоматизирован для дилеров и автопроизводителя, что значительно упрощает процесс работы и управления. Внедрение «умных» программ позволит реализовать дополнительную сервисную поддержку для Клиентов и значительно упростит сопровождение при наступлении страховых случаев».Мировая практика развития «умного» страхования предполагает два пути. Первый – интеграция телематических решений страховыми компаниями, которые продают или дают в аренду «черные ящики» автовладельцам на время действия полиса. Второй – формирование страхового продукта на основе данных, собираемых системой, интегрированной на этапе производства. Второй подход привел к бурному росту «умного» страхования в ЕС, США и Китае в последние годы. В России в силу низкого проникновения добровольного автострахования и исторических особенностей рынка первый путь оказался неэффективен. На этом фоне интеграция телематических систем такими крупными производителями, как АВТОВАЗ, будет стимулировать рынок и повлечет за собой существенный рост проникновения не только «умного» КАСКО, но и добровольного автострахования в целом.Заместитель генерального директора по развитию бизнеса ВСК Ольга Сорокина: «Мы рады старту нового проекта с АВТОВАЗом. Недавно мы обновили программу «Умное КАСКО» для удобства потребителей, оптимизировав внутренние процессы компании с интеграцией оператора телематики. Запуск серийного производства автомобилей LADA с телематической платформой Connected Car позволит реализовать специальные страховые программы и предложить новые возможности для наших клиентов. Благодаря проекту аккуратным водителям будут доступны более персонифицированные условия страхования по КАСКО, дополнительная скидка на страховку автомобиля».По данным ЦБ в 2020 году проникновение КАСКО к ОСАГО в России составило 9,6%. Это очень скромный по мировым меркам результат. Для сравнения, в ЕС этот показатель достигает 78%. Распространение «умного» страхования в массовом сегменте рынка позволит увеличить его, не повышая убытки страховых компаний, что в перспективе может привести к еще большей доступности добровольного страхования.Директор департамента андеррайтинга автострахования АО «АльфаСтрахование» Илья Григорьев: «Наша компания стратегически нацелена на развитие современных программ и технологий, позволяющих улучшать качество клиентского сервиса и портфеля. Благодаря запуску LADA Granta, оснащенных LADA Connect, мы видим большие возможности синергии использования сервисов Connected Car и потенциал для развития современных страховых программ».Лежащая в основе принципа работы «умного» страхования индивидуализация страхового предложения происходит на основе данных о фактическом вождении – сколько и где автомобиль ездит, как часто водитель нарушает правила, превышает скорость или совершает опасные маневры. Сбор этих данных происходит тремя путями: через так называемые «черные ящики» – стационарно установленные в авто подключенные к сети интернет-устройства с акселерометром и GPS/ГЛОНАСС чипом, через мобильные приложения или простые GPS-трекеры. АВТОВАЗ пошел по самому технологичному и перспективному пути, выбрав для своих автомобилей продвинутую «подключенную» систему, которые в мировой практике пока редко применяется при производстве автомобилей массового сегмента.Андрей Ковалев, Директор по розничному андеррайтингу и партнерским продажам страховой компании «Согласие»: «ООО «Согласие» является партнером LADA Страхование с момента запуска программ от автопроизводителя в партнерстве с АО «РН-Банк». Мы следили за ходом реализации проекта и ждали запуск LADA Granta, оснащенных LADA Connect. Функционал автомобиля и телематической платформы позволяет нам вести контроль статистики и убытков в режиме онлайн. В наших планах наращивать продажи специальных программ для «подключенных автомобилей» — это позволит вывести управление продуктами на новый современный уровень и предложить для наших клиентов новые сервисные возможности».LADA Connect позволяет владельцу удаленно управлять функциями автомобиля при помощи смартфона, а также получать статистическую информацию об использовании автомобиля, которая помогает контролировать эксплуатационные расходы и вести удаленную коммуникацию с дилерскими центрами LADA и Автопроизводителем.Генеральный директор «Лаборатории Умного Вождения» Михаил Анохин: «Создание современной цифровой экосистемы вокруг автомобилей LADA открывает новые возможности для автовладельцев и связанных с автомобилями бизнесов. Запуск программ доступного UBI-страхования стало одним из первых подобных решений. Надеюсь, что наши совместные разработки послужат надежным связующим звеном между страховыми компаниями и автомобилистами и это позволит покупателям LADA получить самый доступный и удобный страховой продукт на рынке».***Контакты PR-Служб:АО «АВТОВАЗ» — (8482) 75-77-15, +7 (499) 263-08-50, e-mail: [email protected]ПАО «СК «РОСГОССТРАХ» — Бирюков Андрей Аскольдович (Andrey Biryukov), Руководитель блока PR ПАО «СК «РОСГОССТРАХ», Моб.: +7-910-404-94-56, e-mail: [email protected]СПАО «Ингосстрах» — Людмила Мегаворян, Пресс-секретарь, Моб.: +7 915 402 02 10, [email protected]САО «ВСК» — Ларин Павел, Руководитель направления по связям с общественностьюДепартамент маркетинговых коммуникаций и PR, Блок развития бизнеса, Тел.: +7 (495) 7274444, доб. 2962, Моб.: +7 926 503-17-00, [email protected]ООО «СК «Согласие» — Елена Григорьева, Моб.: +7 903 599 35 59, Олеся Карпова, Моб.: +7 926 911 00 38, e-mail: [email protected]АО «АльфаСтрахование» — Карцева Мария, Руководитель PR-Службы АО «АльфаСтрахование», Моб.: +7 962 923-74-49, e-mail: [email protected]АО «РН-Банк» — Алла Кибизова, Директор по маркетингу, тел.: +7 985 456 00 30, e-mail: [email protected] Towers Watson — Аррожейро Элдер, +7-495-258-55-54, e-mail: [email protected]ООО «АСТ» — Наталья Дегтярева, Директор по маркетингу и развитию, Моб.: +7-903- 100-45-72, e-mail: [email protected]ООО «Лаборатория Умного Вождения» — Александр Корольков, +7-915-497-65-75, e-mail: [email protected]***Группа »АВТОВАЗ» является частью бизнес-подразделения Dacia-LADA в структуре Groupe Renault. Компания производит автомобили по полному производственному циклу и комплектующие для 2-х брендов: LADA и Renault. Производственные мощности АВТОВАЗа расположены в Тольятти – АО »АВТОВАЗ”, ОАО “LADA Запад Тольятти”, а также в Ижевске – ООО »LADA Ижевск». Продукция марки LADA представлена в сегментах В, B+, SUV и LCV и состоит из 5 семейств моделей: Vesta, XRAY, Largus, Granta и Niva. Бренд лидирует на российском автомобильном рынке с долей более 20% и представлен в более чем 20 странах. LADA имеет самую большую официальную дилерскую сеть в России – 300 дилерских центров.ПАО СК «Росгосстрах» — флагман отечественного рынка страхования. На территории Российской Федерации действуют около 1 500 офисов и представительств компании, порядка 300 центров и пунктов урегулирования убытков. В компании работает около 50 тысяч сотрудников и страховых агентов. «Росгосстрах» входит в Группу «Открытие» — один из крупнейших финансовых холдингов нашей страны, и является стратегическим провайдером страховых продуктов и услуг в компаниях группы «Открытие».СПАО «Ингосстрах» — работает на международном и внутреннем рынках с 1947 года, занимает лидирующие позиции среди российских страховых компаний.«Ингосстрах» имеет право осуществлять все виды имущественного страхования, добровольное медицинское страхование и страхование от несчастных случаев и болезней, установленные ст.32.9 Закона РФ «Об организации страхового дела в Российской Федерации», а также перестраховочную деятельность. Компания присутствует в 251 населенном пункте РФ. Представительства и дочерние компании страховщика работают в странах дальнего и ближнего зарубежья.Страховой Дом ВСК (САО «ВСК») работает с 1992 года и является универсальной страховой компанией, предоставляющей услуги физическим и юридическим лицам на всей территории России. Компания стабильно входит в ТОП-10 страховщиков страны по сборам в основных сегментах страхового рынка – автостраховании, страховании от несчастных случаев и болезней (НС) и добровольном медицинском страховании (ДМС). На сегодняшний день более 30 млн человек и 500 тысяч организаций воспользовались продуктами и услугами ВСК. Региональная сеть компании насчитывает свыше 500 офисов во всех субъектах России, что дает возможность эффективно сопровождать договоры страхования по всей стране.ООО «СК «Согласие» входит в единую страховую группу с ООО «Согласие-Вита» и успешно ведет свою деятельность на страховом рынке уже более 27 лет. Внутренняя политика Компании позволяет нам уверенно удерживать высокие позиции на страховом рынке и ежегодно увеличивать число страхователей.Группа «АльфаСтрахование» – крупнейшая частная российская страховая группа с универсальным портфелем страховых услуг, который включает как комплексные программы защиты интересов бизнеса, так и широкий спектр страховых продуктов для частных лиц. Услугами «АльфаСтрахование» пользуются более 31 млн человек и свыше 106 тыс. предприятий. Региональная сеть насчитывает 270 филиалов и отделений по всей стране. Надежность и финансовую устойчивость компании подтверждают рейтинги ведущих международных и российских рейтинговых агентств: «ВВ+» по шкале Fitch Ratings, «ВВB-» по шкале S&P и «ruАAA» по шкале «Эксперт РА» и «ААА ru» по шкале «Национального рейтингового агентства».«РН-БАНК» – «Банк Альянса Renault-Nissan-Mitsubishi». Почти вековая история Банковской Группы Рено берет свое начало в 1924 году во Франции. Сейчас Группа представлена в 36 странах мира, а на российском рынке оказывает поддержку клиентам, выбирающим продукцию брендов Альянса, с 2006 года. Приоритетными направлениями деятельности Банка являются: кредитование физических лиц на приобретение автомобилей брендов Альянса, финансирование дилеров брендов Альянса, а также оказание клиентам сопутствующих финансовых услуг. По состоянию на конец 2019 года Банк занимает 58 место по размеру активов среди российских банков по версии Интерфакс, показав прирост в 19% и поднявшись на 4 позиции за 12 месяцев.Willis Towers Watson — ведущая международная консалтинговая и брокерская компания, разрабатывающая современные бизнес-решения, которые помогают нашим клиентам по всему миру преобразовывать риски в возможности развития и роста. Наша компания была основана в 1828 г., и в настоящее время насчитывает 45 000 сотрудников, предоставляющих услуги для более чем 140 стран и рынков.«Страховые брокеры «АСТ» — являются одним из ведущих страховых брокеров, оказывающих полный спектр страховых брокерских услуг и услуг в области риск консалтинга с 2007 года. ООО «Страховые брокеры «АСТ» оказывают страховые брокерские услуги по всем видам страхования, а также не противоречащие законодательству Российской Федерации сопутствующие консультационные услуги в области управления рисками.«Лаборатория умного вождения» – российский разработчик универсальной автомобильной телематической платформы и системы LADA Connect. Созданные в «Лаборатории умного вождения» аппаратно-программные решения превращают автомобиль в подключённое к сети Интернет устройство. Специалисты «Лаборатории умного вождения» оказывают адаптированный под каждого клиента набор услуг – от круглосуточного мониторинга состояния автомобиля и защиты от угона до анализа эксплуатационных параметров, контроля расходов и оценки безопасности вождения. Страховым компаниям решения «Лаборатории умного вождения» помогают провести селекцию страхового портфеля и сформировать индивидуальные страховые тарифы для клиентов. Автопроизводителям и автопаркам – внедрить инновационные подходы в бизнесе.
21073-1202005-00 Глушитель дополнительный (резонатор) ВАЗ-2173 (закатной) короткий под катазатор Ижорский Глушитель
С 08.08 воскресенье в авто-тех является выходным днем! Доставка по Москве пешим курьером 599 руб, водителем 899 руб! Звоните! +7-495-544-24-98. ВНИМАНИЕ! ОБСЛУЖИВАЕМ КЛИЕНТОВ ТОЛЬКО В МАСКАХ И ПЕРЧАТКАХ. Срочная доставка по Москве от 1-го часа!
Код | 1287 |
Оригинальный номер | 21073-1202005-00 |
Артикул производителя | 136069 |
Тип товара | Решетка |
Узнать цену
В магазине «Авто-тех» вы можете купить Глушитель дополнительный (резонатор) ВАЗ-2173 (закатной) короткий под катазатор Ижорский Глушитель самовывозом или с доставкой по Москве и городам России . Получите консультацию по любому техническому или организационному вопросу по телефону +7-495-544-24-98 или по элект. почте: [email protected]
Стекло передней двери опускное ВАЗ 21123,2173 (купе) левое
Наличие в 1 магазине
Отсутствует на складе
На складе: 1 шт.
Нет в наличии
Артикул: 21123-6103215-05
Вес: 3.3 кг
Высота: 530 мм
Длина: 870 мм
Ширина: 3 мм
Применимо к авто: ВАЗ
Страна производителя: Россия
Универсал Lada Priora — семейный приоритет
В декабре 2008 г. пресс-служба «АвтоВАЗа» сообщила, что новая модификация модели Lada Priora в кузове «универсал» будет доступна на российском рынке со второго квартала 2009 года.
Новый представитель семейства автомобилей Lada Priora (ВАЗ 2173 Приора) дебютировал в октябре 2008 года в рамках автомобильной выставки MOBI, которая состоялась в Краснодаре. Вскоре новую модель показали также на питерском автосалоне «Авто+Механика 2008». Пополняя модельный ряд Priora еще одной модификацией, российский автопроизводитель видимо намерен составить конкуренцию бюджетным зарубежным автомобилям, представленным на российском рынке, а также максимально расширить свою клиентскую базу и представить отечественному покупателю полную гамму автомобилей, соответствующих европейским стандартам.
Универсал Lada Priora (ВАЗ 2173 Приора)
Кроме того, универсал Lada Priora должен, по замыслу «АвтоВАЗа», сменить на производственном конвейере устаревшую модель ВАЗ 2111, которую волжский завод выпускает уже на протяжении 12-и лет. Первые, выпущенные в декабре прошлого года, пробные универсалы дали возможность для заводских специалистов протестировать работу некоторых опций. Речь идет, в частности, и о новой аудиосистеме, которой в наступившем году будут оснащать «топовые» модели семейства Lada Priora. В январе 2009 г. автопроизводитель намеревается произвести еще 12 испытательных единиц нового авто. По предварительной информации уже к февралю текущего года волжский автозавод планирует завершить подготовку работы конвейера по выпуску серийного универсала Lada Priora.
Универсал Lada Priora (ВАЗ 2173 Приора)
Как сообщает сам производитель, новую модификацию отличает 200 оригинальных деталей. Основным отличием экстерьера «вазовского» универсала считается дизайн задней части.
По словам руководителя проекта В.Козленко, дизайн задней части универсала Lada Priora является абсолютно новым решением, которое выгодно отличает новую модификацию от модели Lada 111. Оригинальностью в данном случае называется решение дизайнеров встроить задние фонари в рамку откидной задней двери автомобиля, а также добавить багажнику порог. С претензией на некоторого рода индивидуальность автомобиля говорится также и о таких элементах экстерьера, как боковые стекла оригинальной формы, бампера, задние крылья. В целом относительно внешнего вида нового «вазовского» универсала хотелось бы весьма оптимистично заметить, что старались все-таки дизайнеры и стремились внести какие-то свежие идеи в экстерьер автомобиля. Так что новая модификация в сравнении с другими моделями Lada выглядит по-своему свежо. Новая модификация на 20 мм. короче, чем автомобиль в кузове седан, в итоге длина универсала составила 4330 мм. А вот по высоте новинка опередила на 60 мм и седан, и хэтчбек Lada Priora — 1480 мм. Именно такое конструкторское решение позволило сохранить показатели вместимости модели. Максимальный объем багажника универсала доходит, в случае если сложить в пропорции 60/40 спинки сидений заднего ряда, до 1420 л., базовый объем составляет 426 л. Грузовые способности нового «вазовского» универсала остались такими же, как и у его предшественницы, модели Lada 111, и составили 500 кг.
Универсал Lada Priora (ВАЗ 2173 Приора)
Модель будет оснащаться 8-и и 16-клапанными бензиновыми двигателями объемом 1.6 литра (92 и 98 л.с.), в сочетании с пятиступенчатой механической КПП. Возможно «универсальная» Lada Priora в будущем получит и 1,3–литровый дизельный мотор (70-90 л.с.) Fiat Miltijet, который планируют собрать на заводе в Тольятти.
Универсал Lada Priora (ВАЗ 2173 Приора)
Не может не радовать и тот факт, что универсал Lada Priora (ВАЗ 2173 Приора) получил обширный список систем оснащения. Авто будет укомплектовано максимально, так обещает производитель. Кроме того, что, как и другие модели Priora (в зависимости от комплектации), универсал может быть оснащен ABS и подушками безопасности, в салоне нового авто есть и крепление Isofix для детского кресла.
Универсал Lada Priora (ВАЗ 2173 Приора)
Возможными конкурентам модели являются и универсал «Калина», который заметно компактнее и будущий универсал на базе Logan, сроки начала производства которого, правда пока не известны. Ближайшие конкуренты из новых иномарок, вроде универсалов Chevrolet Lacetti, Ford Focus или стильного Kia Ceed стоят гораздо дороже, хотя конечно они заметно превосходят «вазовскую» модель во всех номинациях, возможно, кроме стоимости сервиса.
Универсал Lada Priora (ВАЗ 2173 Приора)
Универсал будет видимо самым дорогим в семействе, после седана и хэтчбека. Появление первых товарных автомобилей в автосалонах стоит ожидать в марте.
Мнение «АвтоНавигатора»
Пока «ВАЗ» готовит свой новый универсал «Лада Приора» к серийному запуску, дополнительную информацию о модели можно домысливать. Безусловно, универсал — модификация, у которой достаточно широкий круг покупателей, которые ценят в таких авто, прежде всего функциональность, практичность и пристально смотрят на цену. Сможет ли Lada Priora российской сборки отличиться по этим параметрам — вопрос практики. Однако большая вместительность багажника, а также достаточно эргономичный салон стоит отнести к явным преимуществам модели, не забывая про цену. Остается только оптимистично надеяться, что по другим важным показателям новый универсал не огорчит традиционных приверженцев марки.
1 | Шины (всесезонные) для Лада Приора ВАЗ-2173 | 1 Комплект(компл), 400.00 BYN | Завершен | |
---|---|---|---|---|
Позиции лота
| ||||
2 | Шины (всесезонные) для ВАЗ 21-07 | 1 Комплект(компл), 400.00 BYN | Завершен | |
Позиции лота
| ||||
3 | Набор ключей и отверток для автомобиля Лада Приора ВАЗ-2173 | 1 Комплект(компл), 50.00 BYN | Завершен | |
Позиции лота
| ||||
4 | Набор ключей и отверток для автомобиля ВАЗ 21-07 | 1 Комплект(компл), 50.00 BYN | Завершен | |
Позиции лота
| ||||
5 | Комплект замены масла для автомобиля | 2 Комплект(компл), 100.00 BYN | Завершен | |
Позиции лота
| ||||
6 | Комплект ремней для Лада Приора ВАЗ-2173 | 1 Комплект(компл), 70.00 BYN | Завершен | |
Позиции лота
| ||||
7 | Комплект ремней для автомобиля ВАЗ 21-07 | 1 Комплект(компл), 70.00 BYN | Завершен | |
Позиции лота
| ||||
8 | Домкрат гидравлический | 1 Штука(шт), 80.00 BYN | Завершен | |
Позиции лота
| ||||
9 | трос для буксировки | 2 Штука(шт), 30.00 BYN | Завершен | |
Позиции лота
|
BAUTLER BTL0084T Термостат ВАЗ 2110-2115, 2170-2173 Priora с инжекторным двигателем, в сборе. Выпуск с 08.2003 г. 6
Купить в Москве дешево в розницу и оптом BAUTLER BTL0084T термостат ваз 2110-2115 2170-2173 priora с инжекторным двигателем в сборе выпуск с 082003 г 6
Поиск по артикулу (коду)
BAUTLER BTL0084T Термостат ВАЗ 2110-2115, 2170-2173 Priora с инжекторным двигателем, в сборе. Выпуск с 08.2003 г. 6
BAUTLER BTL0084T Термостат ВАЗ 2110-2115, 2170-2173 Priora с инжекторным двигателем, в сборе. Выпуск с 08.2003 г. 6
Информация о производителе Термостат ВАЗ 2110-2115, 2170-2173 Priora с инжекторным двигателем, в сборе. Выпуск с 08.2003 г. 6 |
©2016-2021 Гермес, ООО. Все права защищены
Продажа запчастей в Москве и по всей России.
Москва, 3-й Угрешский пр., д. 12А
+7 (495) 940-82-80
FINWHALE 13075GL
FINWHALE 13075GL Амортизатор пер. лев. газовый / Almera Classic (B10)(06-13) /Almera(N16)(00-06) /5430395F0B; E4303BM425; 4421031700; |
KRONER K156208
KRONER K156208 Ступица 2108 голая, задняя |
KORTEX KSA613STD
Амортизатор FORD FUSON 08/02- зад.газ. KORTEX KSA613STD |
ALCA 104000
ALCA 104000 Щётка с/очистителей каркас. 35см ALCA 104000 |
FINWHALE 13069GL
FINWHALE 13069GL Амортизатор пер. лев. газовый / Sorento(XM)(09-12) / 546502P100; 546502P000; 546502P500; |
FINWHALE 23032GL
FINWHALE 23032GL Амортизатор зад. лев. газовый / Tucson(04-10), Sportage(04-10) / 553512E001; 553512E501; 553502E500; 553512E201; 55351 |
FINWHALE 13033GR
FINWHALE 13033GR Амортизатор пер. прав. газовый / Santa FE(00-06), Santa FE Сlassic(07-12) / 5466026300; 5466026100; 5466026600; |
Время выполнения запроса: 4.7 мсек.
Вид: Cytobacillus purgationiresistens
Имя: Cytobacillus purgationiresistens (Vaz-Moreira et al. 2012) Patel and Gupta 2020
Категория: Виды
Предлагается как: гребн. ноя
Басоным:
Bacillus purgationiresistans Vaz-Moreira et al. 2012
Этимология:
pur.ga.ti.o.ni.re.sis’tens. L. fem. п. purgatio (gen. Purgationis) — очищение, очищение; L. pres. часть. сопротивляется сопротивляется; Н.Л. часть. прил. purgationiresistens , сопротивляясь очищению, очищению
Пол:
мужской
Тип штамма:
DS22; DSM 23494; LMG 25783; NRRL B-59432
См. Подробную информацию о деформации на
Проведите таксономию на основе генома в
Ген 16S рРНК:
FR666703
Анализировать
FASTA
Действующая публикация:
Патель С., Гупта Р.С.Филогеномная и сравнительная геномная структура для разрешения полифилии рода Bacillus : предложение для шести новых родов видов Bacillus , Peribacillus gen. nov., Cytobacillus gen. nov., Mesobacillus gen. ноя, Neobacillus gen. nov., Metabacillus gen. ноя и Alkalihalobacillus gen. ноя Int J Syst Evol Microbiol 2020; 70 : 406-438.
Список IJSEM:
Орен А., Гэррити ГМ.Список уведомлений. Уведомление о появлении новых имен и новых комбинаций в томе 70, части 1 IJSEM. Int J Syst Evol Microbiol 2020; 70 : 2167-2173.
Номенклатурный статус:
действительно опубликовано в соответствии с ICNP
Таксономический статус:
правильное название
Родительский таксон:
Cytobacillus Patel and Gupta 2020
Назначил:
Патель С., Гупта Р.С.Филогеномная и сравнительная геномная структура для разрешения полифилии рода Bacillus : предложение для шести новых родов видов Bacillus , Peribacillus gen. nov., Cytobacillus gen. nov., Mesobacillus gen. ноя, Neobacillus gen. nov., Metabacillus gen. ноя и Alkalihalobacillus gen. ноя Int J Syst Evol Microbiol 2020; 70 : 406-438.
Ссылка:
Для постоянной ссылки на эту страницу используйте https: // lpsn.dsmz.de/species/cytobacillus-purgationiresistensСкопировать в буфер обмена Ссылка скопирована в буфер обмена
Номер записи:
7400
Разложение изооктана Mycobacterium austroafricanum IFP 2173: Рост и катаболический путь
Водные объекты становятся загрязненными углеводородами, когда в них попадает нефть и другие токсичные органические вещества. Пантека, расположенная в северной части Кадуны, Нигерия, является домом для рынка Пантека, который является промышленным центром, где продаются различные виды автомобильных запчастей и расположены механические мастерские.Река Пантека протекает через точку входа в Рафин гуза, через рынок Пантека и в направлении Национального глазного центра. Беспорядочная утилизация отработанных моторных масел и сброс других неочищенных сточных вод из авторемонтных мастерских в поток Пантеки может привести к загрязнению углеводородами. Следовательно, существует необходимость идентифицировать эти углеводороды и определять способность бактерий, выделенных из потока, разлагать углеводородные загрязнители. Используя метод наливных чашек и агар Бушнелл-Хааса с добавлением 1% отработанного моторного масла, пять бактериальных изолятов, способных разлагать углеводороды, были идентифицированы как Streptococcus pnuemoniae, Klebsiella pneumoniae, Shigella dysenteriae, Streptococcus pyogenes и Salmonella enterica.Salmonella enterica была подтверждена секвенированием гена 16S рРНК и инструментом поиска Basic Local Alignment (BLAST) с индексом сходства 99%. Способность бактериальных изолятов переносить отработанное моторное масло определяли по мутности. Результаты показывают, что все пять бактериальных изолятов выдерживали концентрацию отработанного моторного масла 1% (об. / Об.). Самые высокие скорости роста (OD 0,565 и O.D 0,695) были получены для чистых культур Streptococcus pyogenes и смешанного бактериального консорциума, соответственно.Потенциал бактерий разлагать углеводороды в потоке был проанализирован с использованием газового хроматографического детектора ионизации пламени (GC-FID), и результаты показали снижение общего содержания углеводородов в нефти (TPH) с 6056 мг / мл до 100,17 мг / мл ( 98,3% деградации) после 28 дней обработки смешанной бактериальной культурой. Разложившиеся углеводородные фракции представляли собой н-нонан, н-декан, н-ундекан, н-додекан, н-тридекан, н-тетрадекан, н-гептадекан, пристан, н-октадекан, фитан, н-эйкозан, н-трикозан, н -Тетракозан, н-октакозан, н-триаконтан, н-дотриаконтан, н-тритриаконтан, н-гептриаконтан; в то время как н-пентадекан, н-гексадекан, н-нонадекан, н-геникозан, н-докозан, н-пентакозан, н-гексакозан, н-гептакозан, н-нонакозан, н-гентриаконтан, н-тетратриаконтан, н-пентатриаконтан, н-пентатриаконтан н-гексатриаконтан не разлагался.Это исследование показывает, что эти бактериальные штаммы, выделенные из ручья Пантека, обладают большим потенциалом для биоремедиации углеводородов, обнаруженных в ручье. Ключевые слова: биоремедиация, ручей Пантека, автомобильная мастерская, углеводородное загрязнение, изоляты бактерий
Стабильность и ядерная локализация теломеразы дрожжей зависят от белковых компонентов РНКазы P / MRP
Штаммы для изучения эффектов восстановленных белков Pop
Цель данной статьи заключается в определении функционального значения ассоциации белков Pop с теломеразой.Эта цель осложняется тем фактом, что все субъединицы РНКазы P / MRP необходимы для обработки тРНК и рибосомных РНК. Следовательно, отсутствие какой-либо одной субъединицы в конечном итоге останавливает синтез белка. Прямое воздействие Pop-белков на теломеразу следует отличать от их воздействия на синтез белка.
Эксперименты проводились с использованием чувствительных к температуре штаммов pop и их изогенных контролей WT 26 . Хотя штаммы pop были известны своей чувствительностью к температуре, в остальном они не были охарактеризованы.Хотя некоторые эксперименты были проведены на клетках pop7-PH , фенотип коротких теломер в этом штамме не был полностью подавлен путем введения плазмидного гена POP7 . Поэтому мы сообщаем только об экспериментах, проведенных в ячейках pop1-500 и pop6-502 (далее pop1 и pop6 ). Секвенирование мутанта pop1 показало, что у него было семь аминокислотных замен, распределенных по всему белку из 875 аминокислот (рис.2а). POP6 кодирует белок из 158 аминокислот. Мутантный аллель pop6 имел делецию одного нуклеотида ближе к концу открытой рамки считывания. Эта делеция изменила последовательность из 8 аминокислот, а также ввела стоп-кодон, что привело к усечению девяти аминокислот (рис. 2b).
Рис. 2: Рост и глобальные уровни белка аналогичны в клетках pop и WT при 24 ° C.
Диаграммы белков, кодируемых аллелями pop , использованными в данном документе.Тихие мутации не показаны. a Показаны положения семи аминокислотных замен в 875 аминокислотном белке, кодируемом аллелем pop1 (синий). Нуклеотидные мутации, которые привели к этим заменам: 225 G → A, 427 A → T, 526 T → A, 535 T → A, 695 A → T, 792 T → C, 1237 G → A, 1627 A → G, 2132 A → G (числа — положения измененных нуклеотидов). b Схема белка, продуцируемого аллелем pop6 (фиолетовый), который содержит делецию в нуклеотиде 421, приводящую к замене восьми аминокислот (аминокислоты 142–149) и потере девяти концевых аминокислот (пунктирные линии от 150–158) за счет стоп-кодона в положении 150.Скорость роста клеток pop1 и pop6 при c 24 ° C и d 30 ° C. и Pgk1 и белки тубулина из клеток WT, pop1, или pop6. клеток, выращенных в течение ~ 50 поколений, анализировали с помощью вестерн-блоттинга. Несмотря на то, что в этом западном исследовании оказалось, что в WT больше Pgk1, чем в , попадающих в клеток при 24 ° C, при использовании двустороннего теста Стьюдента t различия не были значительными. Общий белок окрашивали Ponceau S. f Вестерн-блоттинг белков из контрольного штамма без метки или WT или pop6 клеток , экспрессирующих HA-Pop1 WT , или клеток, экспрессирующих HA-Pop1 mut . г Количественное определение уровней HA-Pop1 из трех биологических повторов (черные кружки) WT (серый столбец), pop1, (синий столбец) и pop6 (фиолетовый столбец), выращенных при 24 ° C, были нормализованы на тубулин и белок WT. уровни. (Поскольку мутант Pop6, меченный эпитопом, не поддерживал жизнеспособность, влияние температуры на Pop6 не изучалось).Планки погрешностей представляют собой одно стандартное отклонение от среднего значения трех или более независимых экспериментов. P -значения были рассчитаны с использованием непарного двустороннего критерия Стьюдента t ; * P ≤ 0,05 , ** P ≤ 0,01, *** P ≤ 0,001, **** P ≤ 0,0001; NS, не значимо, P > 0,05. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Чтобы установить подходящие условия для экспериментов, мы определили скорость роста pop мутантов при различных температурах.При 24 ° C клетки pop1 и pop6 имели время удвоения, аналогичное времени удвоения WT как в жидкой, так и в твердой среде (рис. 2c; дополнительный рис. 1). При 30 ° C клетки pop1 и pop6 росли бесконечно, но их скорость роста была значительно ниже, чем у WT (Рис. 2d; Дополнительный Рис. 1). При 37 ° C оба мутанта делились всего несколько раз. Таким образом, 24 ° C, 30 ° C и 37 ° C являются соответственно допустимыми, полупермиссивными и недопустимыми температурами для клеток pop1 и pop6 .
Глобальные уровни белка были одинаковыми в клетках pop1, pop6, и WT при 24 ° C, но были заметно ниже при 30 ° C (рис. 2e). По данным вестерн-блоттинга, уровни альфа-тубулина и белка Pgk1 были аналогичны WT при 24 ° C, но только 0,5 × WT при 30 ° C (рис. 2e). Уровни мутанта Pop1 (HA-Pop1 mut ) снижались даже при 24 ° C (0,6 × WT Pop1). Кроме того, при 24 ° C HA-Pop1 WT был менее обильным в pop6 , чем в клетках WT (0,3 × уровни WT; фиг. 2f, g). Таким образом, количество некоторых (и, возможно, большинства) белков практически не изменилось в pop клетках при 24 ° C.Однако мутант Pop1 и, вероятно, Pop6 были нестабильны даже при допустимых температурах. Основываясь на этих результатах, все эксперименты проводились при 24 ° C, так как скорость роста и объемные уровни белка были аналогичны WT, но уровни Pop1 (и, вероятно, Pop6) были снижены. Многие эксперименты также проводились при 30 ° C. Мы предположили, что фенотип, который выявлялся при разрешающей температуре (24 ° C) и ухудшался при полупермиссивной температуре (30 ° C), вероятно, был прямым влиянием Pop-белков на теломеразу.
pop мутанты имеют более короткие теломеры, чем клетки WT
Чтобы определить, необходимы ли белки Pop для длины теломер WT, теломеры были измерены с помощью саузерн-блот-анализа (рис.3). Средняя длина теломер в изогенных клетках WT составляла 385 пар оснований (п.н.) при 24 ° C и 400 п.н. при 30 ° C. При 24 ° C теломеры в клетках pop1 и pop6 были короткими (~ 0,7 × WT; P <10 −3 , если не указано иное, непарные двусторонние тесты Стьюдента t использовались для определить статистическую значимость; см. рис. 3c для более подробной информации). Степень укорочения была еще больше при 30 ° C (0,6 и 0,5 × WT; рис. 3a, b). Фенотип коротких теломер был обращен путем введения плазмидной копии POP1 или POP6 .В отличие от клеток, дефицитных по теломеразе, длина из теломер была стабильной, и клетки не старели. Поскольку укорочение теломер было очевидным при 24 ° C, когда скорости роста и уровни белка были сходными в WT и мутантных клетках, это, вероятно, было связано с уменьшением численности и / или функции Pop1 и / или Pop6. Мы заключаем, что Pop1 и Pop6 необходимы для длины теломер WT.
Рис. 3: pop 1 Клетки и pop6 имеют короткие теломеры при 24 и 30 ° C, которые меняются местами путем введения WT-копии POP1 или POP6 . ДНК
выделяли из указанных штаммов, расщепляли XhoI и анализировали методом Саузерн-блоттинга с использованием радиоактивно меченного зонда TG 1-3 . Клетки выращивали при 24 или 30 ° C в течение ~ 75 поколений перед экстракцией ДНК. а, б EV, пустой вектор; p POP1 или p POP6 , тот же вектор, содержащий POP1 или POP6 . Пунктирными белыми линиями отмечена средняя длина теломер в каждом образце. c Количественное определение длины теломер минимум трех биологических изолятов каждого штамма.Размер теломерных трактов определяли путем вычитания 875 нт Y ’ДНК из размеров концевых фрагментов XhoI. Введение WT-копии гена POP изменило укорочение теломер в клетках pop1 и pop6 . P-значения были рассчитаны с использованием непарного двустороннего критерия Стьюдента t ; * P ≤ 0,05 , ** P ≤ 0,01, *** P ≤ 0,001, **** P ≤ 0,0001; NS, не значимо, P > 0,05. Звездочки указывают на значимость различий в длине теломер в pop клетках по сравнению с WT.
Короткие теломеры в
pop клетках не являются следствием низкого Est1 или 2
Чтобы определить, является ли количество ключевых субъединиц теломеразы зависимым от белка Pop, мы провели вестерн-блоттинг на WT и pop клетках, экспрессирующих эпитоп, помеченный Est1 или Est2 (рис. 4a – d). При 24 ° C уровни Est1 существенно не отличались от WT у обоих штаммов pop ( P = 0,19) (рис. 4a, b). По сравнению с уровнями WT, численность Est2 была незначительно увеличена у pop1 (1.3 × WT, P = 0,01) и уменьшилось в pop6 клетках (0,7 × WT, P = 0,05; рис. 4c, d). При 30 ° C уровни Est1 и Est2 в обоих штаммах pop составляли ~ 0,3 × и ~ 0,6 × уровни WT, соответственно (снижение уровней Est2 было значительным только в клетках pop1 ; рис. 4b, d). Обилие контроля загрузки было также уменьшено (~ 0.5 × WT; рис. 4a, c). Поскольку не было значительных тенденций в уровнях Est1 или Est2, которые коррелируют с короткими теломерами, мы заключаем, что короткие теломеры в , выращенных при 24 ° C, попадают в клетки не объясняются снижением Est1 или Est2.
Рис. 4. При 24 ° C уровни TLC1 выше в pop клетках, в то время как уровни Est1 и Est2 аналогичны WT.
Белковые экстракты из указанных штаммов, выращенных при 24 или 30 ° C, анализировали вестерн-блоттингом с использованием MYC-антитела для обнаружения a Est1-MYC или c Est2-MYC. [(Уровни Est3 не определялись, потому что у нас нет меченого эпитопом аллеля Est3, который имеет длину теломер WT и может быть обнаружен вестернами в экстрактах целых клеток 4 ].Уровни b Est1-MYC и d Est2-MYC из трех биологических повторностей (черные кружки), выращенных при 24 ° C, определяли количественно после нормализации до уровней тубулина в тех же образцах. Нормализованное значение каждого белка в клетках дикого типа принимали за единицу. При 30 ° C уровни Est1-MYC и Est2-MYC в pop клетках были нормализованы только до уровня Est1 или Est2 дикого типа, поскольку уровни тубулина и Pgk1 также были ниже при 30 ° C. Показано кратное различие Est1-MYC или Est2-MYC в клетках pop1 и pop6 по сравнению с WT.Контролем загрузки (LC) для Est1-MYC western при 30 ° C был Pgk1. Для всех остальных вестернов LC был тубулин. e Тотальную РНК экстрагировали из клеток, выращенных при 24 ° C или 30 ° C в течение ~ 50 поколений. Уровни РНК определяли с помощью RT-qPCR для e TLC1 или f NME1 в WT (серые столбцы), pop1 (синие столбцы) и pop6 (фиолетовые столбцы). Показаны индивидуальные биологические реплики (черные кружки). Уровни TLC1 и NME1 были нормализованы до уровней мРНК ACT1 в тех же образцах с использованием метода 2 -ΔΔCt 56 .Как при 24, так и при 30 ° C, увеличение TLC1 (и уменьшение NME1) РНК в pop клетках подавлялось копией WT мутантного гена POP . Планки погрешностей представляют собой одно стандартное отклонение от среднего значения трех или более независимых экспериментов. P -значения были рассчитаны с использованием непарного двустороннего критерия Стьюдента t ; * P ≤ 0,05 , ** P ≤ 0,01, *** P ≤ 0,001, **** P ≤ 0,0001; NS, не имеет значения, P > 0.05. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Уровни TLC1 высокие, а уровни NME1 низкие в
pop клетках
Поп-белки связываются непосредственно со своими РНК-мишенями: TLC1, NME1 и RPR1 22,27 . NME1 и RPR1 менее распространены в Pop-дефицитных клетках 28 . Чтобы определить, были ли уровни TLC1 снижены аналогичным образом, мы использовали количественную ПЦР с обратной транскриптазой (RT-qPCR) (рис. 4e). При 24 ° C уровни TLC1 были в 2 раза выше у обоих штаммов pop ( P <0.05). Это увеличение было еще выше при 30 ° C (4–8 × WT; P <0,01; рис. 4e). Напротив, при 24 ° C, NME1 был ниже у обоих штаммов pop (~ 0,4–0,7 × WT; P <0,03; рис. 4f). Уровни NME1 были еще ниже при выращивании при 30 ° C pop клеток (~ 0,25 × WT; P <0,001). Таким образом, фенотипы коротких теломер клеток pop1 и pop6 не являются следствием снижения TLC1. Неожиданно Pop-белки по-разному действуют на NME1 и TLC1, даже несмотря на то, что они связываются с областями со сходной последовательностью и структурой в двух РНК 22 .
Короткие теломеры в
pop клетках не являются следствием титрования Yku
Гетеродимер Yku не только связывает TLC1, он также связывает теломеры независимо от его ассоциации с TLC1 3 . Это связывание защищает теломеры от нуклеолитической деградации в фазе G1 29,30 . Когда TLC1 экспрессируется на очень высоком уровне, он титрует Yku из теломер, что приводит к укорачиванию теломер 16 . Эти результаты повысили вероятность того, что короткие теломеры в популяции клеток могут быть объяснены удалением Yku из теломер из-за увеличения TLC1 (дополнительный рис.2). Если pop мутантов и истощение Yku влияют на длину теломер по одному и тому же механизму, теломеры должны быть одинаково короткими у двойных по сравнению с одиночными мутантами. Однако двойные мутанты ( pop1 или pop6 yku70Δ клеток) имели даже более короткие теломеры по сравнению с любыми одиночными мутантами ( P <0,001; дополнительный рис. 2). Таким образом, фенотипы коротких теломер у pop мутантов не связаны с потерей Yku из теломер.
Уровни триметилированного TLC1 аналогичны в клетках
pop и WT
2,2,7-триметилирование (TMG) 5′-метилгуанозинового (m7G) кэпа TLC1 катализируется в ядрышке метилтрансферазой Tgs1 31 .Приобретение TMG, вероятно, необходимо для выхода из ядрышка, поскольку TLC1 накапливается там в tgs1Δ клетках 13 . Чтобы контролировать эффективность триметилирования, мы иммуно-преципитировали TLC1 с помощью антитела против TMG (Millipore). Количество осажденного TLC1 существенно не отличалось в pop1 или pop6 клетках WT при 24 ° C ( pop1 P = 0,15; pop6 P = 0,5) или 30 ° C (рис. 5; pop1 P = 0.3; pop6 P = 0,6). Мы пришли к выводу, что белки Pop не влияют на приобретение кэпа TMG.
Рис. 5: Триметилирование 5′-кэпа TLC1 не затрагивается в pop клетках.
Суммарная РНК была экстрагирована из клеток WT (серые столбцы), pop1, (синие столбцы) и pop6, (фиолетовые столбцы), а TLC1 с кэпом TMG был иммунопреципитирован с использованием антитела против TMG в клетках, выращенных при 24 ° C ( a ) или 30 ° C ( b ). TLC1 в иммуно-преципитате измеряли с помощью RT-qPCR.IP / INPUT TLC1 был нормализован до мРНК IP / INPUT ACT1 . Столбцы — данные трех независимых биологических изолятов (черные кружки). Планки погрешностей представляют собой одно стандартное отклонение от среднего значения трех или более независимых экспериментов. P-значения были рассчитаны с использованием непарного двустороннего критерия Стьюдента t ; * P ≤ 0,05 , ** P ≤ 0,01, *** P ≤ 0,001, **** P ≤ 0,0001; NS, не значимо, P > 0,05. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Последовательность 3′-концов TLC1 не изменяется в
pop клетках
РНКаза P / MRP использует свою эндонуклеазную активность для обработки субстратов РНК. Таким образом, мы определили, изменилась ли обработка TLC1 у pop мутантов. TLC1 существует в двух формах: длинной поли (A) форме (~ 1300 нт), которая составляет небольшую долю от общего TLC1, и более короткой форме поли (A) минус (~ 1157 н.), В которой также отсутствует ~ 140 нуклеотидов из 3 ′ конец длинной формы. Короткая форма, на которую приходится большая часть TLC1, очищается с помощью активной теломеразы 12 .Для поли (A) формы 32 функция неизвестна.
Есть две модели, объясняющие появление поли (A) TLC1. Первая модель предполагает, что зрелый TLC1 образуется в результате расщепления поли (A) изоформы 10 . Вторая модель предполагает, что 3′-конец зрелого TLC1 генерируется поли (A) -независимым путем терминации транскрипции 32,33 . Согласно этой модели поли (A) TLC1 является тупиковым продуктом, образующимся при сбое завершения 1,32 .Учитывая, что комплексы РНКаза P / MRP обрабатывают другие РНК, первая модель предоставляет потенциально объединяющую гипотезу о влиянии белков Pop на его РНК-мишени. Гипотеза о том, что Pop-белки необходимы для генерации активного TLC1 из более длинной формы поли (A), предсказывает, что доля TLC1 в длинной форме будет выше при выращивании на при 24 ° C и даже выше при 30 ° C.
Чтобы определить, влияют ли белки Pop на добавление поли (A), мы определили долю TLC1 в двух изоформах в pop и WT клетках с помощью северного анализа (данные не показаны) и 3′-RACE (быстрой амплификации концов кДНК. ).Вопреки первой гипотезе соотношение длинных и коротких форм TLC1 было значительно ниже в клетках pop1 и pop6 , чем в клетках WT при 24 ° C (рис. 6b; отношения ~ 0,80, WT; ~ 0,45, pop ячеек; pop1 P = 0,01; pop6 P = 0,03). Соотношения были еще ниже в популяции клеток при 30 ° C.
Рис. 6. Обработка 3′-концов TLC1 не изменяется в pop клетках при 24 ° C.
3′-концевые последовательности TLC1, экстрагированные из клеток, выращенных при 24 или 30 ° C, анализировали с помощью 3′-RACE. a Диаграмма 3′-конца TLC1 от нуклеотидов с 1139 по 1164. Последний нуклеотид в молекуле зрелого TLC1 длиной 1157 нуклеотидов обозначен красной стрелкой. b продуктов ПЦР, амплифицированных с кДНК TLC1, анализировали в 1% агарозном геле. Ожидаемые размеры зрелой и предшественницы TLC1 составляют, соответственно, ~ 220 и ~ 350 п.н. По сравнению с WT, относительное обилие коротких и длинных форм было выше в клетках pop1 и pop6 при 24 ° C и особенно 30 ° C.Соотношение длинных и зрелых форм показано ниже. Все ампликоны <500 нт, показанные на панели B, были очищены и глубоко секвенированы. Относительная численность каждого вида TLC1, определенная секвенированием, была определена количественно. Последовательности, которые выровнены с концом от 1154 до> 1159 нуклеотидов TLC1 с поли (A) хвостом или без него, показаны для клеток, выращенных при c 24 ° C или d 30 ° C. Размер поли (A) хвостов: без аденозина (серый), 1 аденозин (оранжевый), 2-5 аденозинов (темно-синий), 6-10 аденозинов (желтый) и> 10 аденозинов (зеленый).Указано общее количество чтений. Каждая полоса показывает среднее значение для биологических дубликатов. При 30 ° C транскрипты, оканчивающиеся на нуклеотиде 1156 [без поли (A)], были значительно более многочисленны при непарном двустороннем тесте Стьюдента t в pop1 и pop6 по сравнению с WT (отмечены звездочкой). Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
В качестве дальнейшего теста мы рассмотрели возможность того, что нарушение процессинга РНК в pop клетках может изменять последовательность 3′-концов TLC1.Мы исключили эту возможность, секвенировав 3′-концы всех кДНК короче 500 п.н. (рис. 6c, d). Распределение длин и последовательностей 3′-концов существенно не различались в клетках pop и WT при 24 ° C. В сочетании с данными TMG 5′- и 3′-концы TLC1 обычно обрабатываются у мутантов pop .
Ассоциация Est1-TLC1 нестабильна в
pop клетках при 24 ° C
Est1 и Est2 связываются непосредственно с теломеразной РНК (рис.1а). Посредством РНК-иммунопреципитации (РНК-IP) Est1 и Est2 связываются на пониженных уровнях с делеционным производным TLC1 22,25 . У этого делеционного производного отсутствует P3-подобный домен CS2a, с которым связываются белки Pop. Чтобы определить, происходит ли обычно ассоциация WT TLC1 с Est1 или Est2 в pop клетках при 24 ° C, мы иммунопреципитировали Est1 или Est2 из мутантных клеток и клеток WT. Затем мы провели RT-qPCR на иммунопреципитате (IP), чтобы определить долю TLC1, которая была связана с Est1 или Est2.Количество TLC1 в IP Est1 было значительно ниже, чем в клетках WT (~ 0,14 × WT в обоих штаммах pop ; P <5 × 10 -4 ; рис. 7a). Это резкое снижение связывания Est1-TLC1 происходило даже при том, что количество Est1 было сходным в pop и WT клетках (фиг. 4a). Ассоциация Est2 с TLC1 была значительно снижена только в pop6 клетках (0,6 × WT, P = 0,01, фиг. 7b).
Рис. 7: Сборка холофермента теломеразы и связывание теломеразы с теломерами недостаточны в pop клетках при 24 ° C.Иммунопреципитации
РНК проводили в клетках WT (серые столбцы), pop1 (синие столбцы) и pop6 (фиолетовые столбцы), экспрессирующих a Est1-MYC или b Est2-MYC. Экстракты, полученные из клеток, выращенных при 24 ° C в течение ~ 50 поколений, подвергали иммуноосаждению с помощью антитела против MYC, и количество TLC1 в каждом преципитате определяли с помощью RT-qPCR. Уровни IP / INPUT TLC1 были нормализованы до уровней IP / INPUT ACT1 мРНК в каждом образце. Среднее соотношение TLC1 / ACT1 в клетках дикого типа принимали как единицу.Обогащение складок и значимость в pop клетках относительно WT. Анализ иммунопреципитации хроматина в клетках WT, pop1 и pop6 , выращенных при 24 ° C в течение ~ 50 поколений, для определения ассоциации c Est1-MYC или d Est2-MYC с теломерами VI-R (слева) и XV-L (справа). Уровень теломерной последовательности в IP / INPUT был нормализован до количества ARO1 ДНК в IP / INPUT того же образца. Среднее отношение теломерной ДНК к ARO1 в клетках WT определяется как один.Обогащение складок и значимость в pop1 и pop6 клетках относительно WT. Вестерн-блоттинг Est1-MYC или Est2-MYC как во вводимых, так и в иммуно-преципитатах (IP) демонстрирует, что аналогичные количества Est1 и Est2 иммуноосаждены в клетках WT и pop при 24 ° C. Красные стрелки в c) указывают полосу для Est1-Myc. Биологические реплики в a-d показаны черными кружками. Планки погрешностей представляют собой одно стандартное отклонение от среднего значения трех или более независимых экспериментов. P -значения были рассчитаны с использованием непарного двустороннего критерия Стьюдента t ; * P ≤ 0,05 , ** P ≤ 0,01, *** P ≤ 0,001, **** P ≤ 0,0001; NS, не значимо, P > 0,05. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Мы также использовали РНК-IP для определения уровня связывания TLC1 с HA-Pop1 WT в клетках pop6 и HA-Pop1 mut в клетках pop1 (дополнительный рис.3). В клетках, выращенных при 24 ° C, связывание TLC1 с HA-Pop1 mut было только 0,15-кратным от его связывания с WT Pop1 ( P = 0,030). При той же температуре связывание TLC1 с WT Pop1 в клетках pop6 было еще ниже (0,05 × клеток POP6 ; P = 0,007). Снижение связывания TLC1 с Pop1 можно объяснить сниженными уровнями Pop1 в обоих штаммах (рис. 2f, g). Мы пришли к выводу, что мутант Pop1 снижает стабильную ассоциацию Est1 с TLC1 (и в pop6 клетках , Est2).Кроме того, в сочетании с данными о численности Pop1 (рис. 2f, g), стабильность Pop1 и его связывание с TLC1 являются Pop6-зависимыми.
Связывание теломеразы с теломерами недостаточно в
pop клетках
Результаты РНК-IP показывают, что холофермент теломеразы был нестабильным в pop клетках (рис. 7a, b). Это открытие предсказывает, что связывание теломеразы с теломерами будет низким у этих мутантов. Чтобы проверить эту гипотезу, иммунопреципитацию хроматина (ChIP) проводили в клетках WT, выращенных при 24 ° C, pop1 и pop6 , экспрессирующих Est1 или Est2.Мы определили связывание обоих белков с теломерами VI-R и XV-L (рис. 7в, г). Связывание как Est1 (~ 0,3 × WT, P <0,01), так и Est2 (0,7 × WT, P <0,05) было значительно снижено на обоих теломерах у обоих штаммов. Нарушенная стабильность холофермента теломеразы и его пониженное связывание с теломерами, вероятно, объясняют фенотипы коротких теломер клеток pop1 и pop6 при 24 ° C.
Сворачивание TLC1 является WT в
pop клетках, за исключением сайта связывания Pop
РНК-IP (рис.7a, b) показали, что при выращивании при 24 ° C pop клеток уровень ассоциации TLC1 с Est1 составлял только ~ 14% от уровня в клетках WT. Исследования in vitro предполагают, что вторичные структуры NME1 и RPR1 изменяются в отсутствие белков Pop 24,34 . Следовательно, мы рассмотрели возможность того, что структура Est1 и (в меньшей степени) сайтов связывания Est2 в TLC1 может зависеть от белка Pop. Эта модель была привлекательной, поскольку она могла объяснить снижение связывания белков Est с TLC1 в pop клетках.Чтобы проверить эту возможность, мы использовали DMS-MaPseq, метод высокопроизводительного химического исследования структуры РНК in vivo 35,36 . Помимо TLC1, мы определили структуру NME1, которая, как ожидается, будет зависеть от белка Pop, в тех же образцах РНК. Клетки
WT и pop обрабатывали in vivo диметилсульфатом (DMS) (или без него). DMS метилирует неспаренные аденозины и цитозины в РНК 37 . Сайты метилирования были обнаружены с помощью обратной транскриптазы TGIRT III, которая вводит мутации, а не останавливает метилированные сайты 38 .Полученные кДНК были амплифицированы и секвенированы секвенированием следующего поколения. Поскольку ~ 1157 нуклеотидов TLC1 было слишком большим для секвенирования как одного ампликона, он был разделен на три части. В общей сложности мы секвенировали 180 библиотек для мониторинга сворачивания 60% 1157 нуклеотидов TLC1 и ~ 75% 341 нуклеотидов NME1. После предварительной обработки было в среднем 680000 считываний на A или C. Эта глубина охвата достаточна для обнаружения воспроизводимых изменений структурно-зависимых паттернов метилирования, даже если эти изменения происходят только в субпопуляции транскриптов 39,40, 41 .
Чтобы проверить, были ли РНК TLC1 или NME1 по-разному реагировать на DMS в pop по сравнению с клетками WT, мы сначала рассчитали реактивность DMS для каждого нуклеотида. Затем мы использовали dStruct для определения областей со статистически значимыми различиями в реактивности между pop и клетками WT 41 . dStruct использует показатель несходства ( Δd ) для оценки вариации реактивностей в биологических репликах для каждого типа клеток ( pop или WT) и между pop и WT клетками.Затем он проверяет регионы, где последнее отклонение превышает первое, и оценивает значимость таких различий. Статистически значимыми считались области из пяти нуклеотидов (или более), которые имели q-значения <0,1 и Δd > 0,01.
Как и ожидалось, структура NME1 была высокочувствительной к поп-факторам. При 24 ° C было четыре области, которые имели значительно отличающуюся реактивность DMS в pop по сравнению с клетками WT (Рис. 8a – c; Дополнительный Рис. 4). Первый участок (нуклеотиды 37–42) расположен в петле стебля P3, где связываются Pop6 и Pop7 (рис.8а, в; Дополнительный рис. 4). Три других дифференциально реактивных участка были расположены по всему NME1 (нуклеотиды 93–121, область два; нуклеотиды 146–152, область три; нуклеотиды 247–277, область 4; рис. 8a, c). Таким образом, ~ 26% из 256 нт, проанализированных в NME1, соответствовали критериям дифференциальной реактивности в pop клетках по сравнению с клетками дикого типа. При 30 ° C в штамме pop6 присутствовали две дополнительные области статистически значимой модификации (дополнительные рисунки 5-7). Таким образом, структура РНК NME1 глобально изменяется в клетках pop1 и pop6 даже при 24 ° C.
Рис. 8: Глобальная структура NME1, но не TLC1, затрагивается в pop клетках при 24 ° C.
Анализ DMS-MaPseq из штаммов, выращенных при 24 ° C в течение ~ 50 поколений. a Показаны четыре области РНК NME1 со статистически значимой различной реактивностью DMS в клетках pop1 (синие столбцы) и pop6 (фиолетовые столбцы) по сравнению с клетками WT (серые столбцы). Усредняли реактивность DMS из трех независимых биологических повторов. b q Значения и Δ d значений областей 1–4 РНК NME1 в pop1 и pop6 по сравнению с клетками WT.Статистически значимыми считались области из пяти нуклеотидов (или более), которые имели значения q <0,1 и Δd > 0,01. c Четыре области, показанные на (A), картированы в структуре РНК NME1 23 ; номера регионов такие же, как в и . Значительно измененные области отмечены красными прямоугольниками. d Средняя нормализованная реактивность DMS от нуклеотидов 608-615 в TLC1. Эти нуклеотиды находятся в месте связывания Pop6 / 7. Символы такие же, как на панели А. q значений и Δ d значений указанной области в pop1 и pop6 по сравнению с WT. e Увеличенный вид домена CS2a / TeSS TLC1, указанного в d . Нуклеотиды оранжевого цвета указывают на единственные нуклеотиды в TLC1, которые соответствуют критериям дифференциальной реактивности. См. Дополнительные рис. 4–7 для определения реактивности DMS в регионах, где не было значительных различий между pop мутантами и WT. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Неожиданно, TLC1 имел одну короткую область, которая дифференциально реагировала на DMS в pop по сравнению с клетками WT при 24 ° C (фиг. 8d; дополнительный фиг. 9). Измененная область состоит только из семи нуклеотидов в P3-подобном домене CS2a, где связываются Pop6 и Pop7 (рис. 8e). Более высокая реактивность этих нуклеотидов с DMS может быть объяснена снижением связывания Pop1 / 6, которое обычно защищает их от модификации DMS (рис. 1a). Это более низкое связывание ожидается, поскольку Pop1 присутствует на ~ 45% уровней WT в клетках pop1 и pop6 при 24 ° C (рис.2е, ж). Не было других значительных изменений в реактивности DMS в 710 нуклеотидах TLC1, включая сайты связывания для Est1, Est2, Yku, кольца Sm 7 и области матрицы (дополнительные рисунки 8–10). Таким образом, менее 1% проанализированных нуклеотидов в TLC1 соответствовали критериям дифференциальной реактивности в pop по сравнению с клетками WT по сравнению с 26% в NME1. Чувствительность WT DMS сайтов связывания Est1 и Est2 согласуется с близкими к WT уровнями Est1 и Est2 в pop клетках при 24 ° C (рис.4а – г).
При 30 ° C имелось три перекрывающихся региона с дифференциальной реактивностью в TLC1 в обоих штаммах pop , включая сайт связывания для Est1, и две дополнительные области, наблюдаемые только в клетках pop1 или pop6 (дополнительные рисунки. 11–14). Мы пришли к выводу, что белки Pop влияют на глобальную структуру NME1, но не TLC1 при 24 ° C. Сходство DMS-реактивности сайтов связывания Est1 и Est2 в pop и WT клетках при 24 ° C позволяет предположить, что Est1 и Est2 связаны с TLC1 на уровнях, близких к WT, in vivo при этой температуре.Напротив, измененная реактивность DMS сайта связывания Est1 в pop клетках при 30 ° C предполагает, что связывание Est1 снижается при более высокой температуре. Этот вывод согласуется с уменьшением содержания Est1 при 30 ° C (рис. 4a, c).
На первый взгляд данные RNA-IP (рис. 7a, b) и DMS-MaPseq (рис. 8; дополнительные рис. 8–10) при 24 ° C кажутся противоречивыми. По РНК-IP только ~ 14% РНК TLC1 была ассоциирована с Est1. Однако согласно DMS-MaPseq сайт связывания Est1 имел структуру WT, предполагающую аналогичные уровни связывания Est1 с TLC1 в pop и клетках WT при 24 ° C.Как подробно описано в обсуждении, эти два метода отслеживают различные аспекты ассоциации Est1-TLC1. DMS-MaPseq контролирует связывание Est1-TLC1 in vivo. РНК-IP обнаруживает ассоциации Est1-TLC1, которые достаточно стабильны, чтобы сохраняться в течение времени, необходимого для обработки клеточного лизата.
Повторная локализация TLC1 в ядре нарушена в
pop клетках
Хотя нестабильный холофермент, который имеет пониженное связывание теломер, может объяснить фенотип коротких теломер pop клеток, он не объясняет повышенную распространенность TLC1.Высокие уровни TLC1 не являются следствием ошибочного процессинга РНК (Figs. 5, 6), ни его глобального неправильного фолдинга (Fig. 8; Supplementary Figs. 8-10). Однако, если нестабильный холофермент с меньшей вероятностью будет импортирован обратно в ядро, TLC1 может накапливаться в цитоплазме, где он не будет доступен для ядерных экзонуклеаз, которые его разрушают 42 . Чтобы проверить эту возможность, мы использовали РНК FISH, чтобы определить, изменил ли дефицит популяции субклеточное распределение TLC1.
Для обнаружения TLC1 мы использовали Cy3-меченый (зеленый) 52-нуклеотидный ДНК-зонд, комплементарный нуклеотидам 389-414 TLC1.Зонд содержит последовательность из 26 нуклеотидов, которая связывает TLC1, включая опору из 10 нуклеотидов и стержень из 16 нуклеотидов, который образует структуру, подобную шпильке, с петлей из 10 нуклеотидов (фиг. 9a) 43 . Когда часть 10 нтс связывает TLC1, область ствола расстегивается только для полностью совпадающей молекулы РНК, обеспечивая стабильную гибридизацию (рис. 9a). Зонд, содержащий шпильку, имеет более высокую целевую специфичность, чем зонд без маски с той же родственной последовательностью 1,43,44 (дополнительные рисунки 15 и 16). Ядрышко детектировали с помощью похожего по структуре Cy5-меченного (красного) зонда FISH, который нацеливался на транскрибируемый спейсер ITS1 в предшественнике 35s рРНК РНК 45 .Специфичность зонда TLC1 была продемонстрирована его очень низким сигналом в tlc1Δ клетках (дополнительный рисунок 17). Пятна FISH возникли преимущественно из одиночных молекул РНК, как видно из одностадийного фотообесцвечивания (дополнительный рис. 18). Ядро окрашивали DAPI, и размер клеток определяли с помощью DIC-микроскопии. (См. Рис. 9a и дополнительный рис. 19 для репрезентативных изображений.) Пятна TLC1, которые совместно с Cy5 и DAPI были разделены на ядрышковые и ядерные, соответственно.Пятна, которые колокализовались ни с одним, но присутствовали в границах клетки, были классифицированы как цитоплазматические. Наши значения для распределения TLC1 в ядерной и цитоплазматической фракциях были аналогичны тем, о которых сообщали другие для клеток WT, когда наши значения для TLC1 в ядрышковой и нуклеоплазматической фракциях были объединены 46 .
Рис. 9: Повторный вход РНК TLC1 в ядро нарушен в pop клетках.
a Схема метода FISH.Зонды FISH имеют структуру шпильки. Специфичность увеличивается за счет смещения цепи стебля родственной РНК, но любое несоответствие в мишени ингибирует начальное связывание или смещение цепи. TLC1 (зеленый) нацелен коротким 52-нуклеотидным ДНК-меченным Cy3 зондом; ITS1 (красный), ядрышковая РНК, нацелен на Cy5-меченный 52-нуклеотидный олигонуклеотид. Ядро (фиолетовый) визуализируется с помощью DAPI. Составное изображение ячейки pop6 показано с перекрытием 3 каналов. Пятнам TLC1 назначается локализация на основе перекрытия с интенсивностью в двух других каналах.Масштабная линейка: 5 мкм. b Общее количество пятен FISH на клетку в клетках, выращенных при 24 ° C и 30 ° C. Количество проанализированных клеток на штамм варьировалось от 328 до 538. c Распределение пятен для субклеточных компартментов. Нуклеоплазма (NP), ядрышко (NO), цитоплазма (CYT). Усы на распределениях представляют 5 и 95% процентили, прямоугольник простирается от 25 до 75%, середина прямоугольника представляет собой медианное значение, а знак + представляет собой среднее значение. d Пятна и фракции указывают среднюю и стандартную ошибку пятен FISH TLC1 на клетку.Фракции рассчитывали путем нормализации пятен TLC1 в каждом субклеточном компартменте на общее количество пятен TLC1 на клетку. Значения P были рассчитаны с использованием двухвыборочного теста Колмогорова-Смирнова. Черные звездочки указывают на значимость разницы в количестве пятен в pop1 или 6 по сравнению с клетками WT; красные звездочки указывают на значимость разницы в долях пятен в pop1 или 6 клетках WT. Поскольку доля TLC1 в NO была низкой, двукратное фракционное изменение ядрышкового TLC1 в pop1 по сравнению с WT при 24 ° C не было значительным.Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Среднее количество Cy3-меченых пятен FISH на клетку при 24 ° C составляло ~ 9 (WT), 23 ( pop1 ; 2,7 × WT) и 16 ( pop6 ; 1,9 × WT) (рис. 9b). , г). Для каждого штамма количество пятен TLC1 было выше при 30 ° C, чем при 24 ° C (10,5, WT; 31 или 3 × WT, pop1 ; 48 или 4,6 × WT, pop6 ). Кратное увеличение РНК TLC1 в pop по сравнению с клетками WT было значительным при обеих температурах (все значения P <0.005) и замечательно согласуется с кратным увеличением TLC1, как определено с помощью RT-qPCR (фиг. 4e). Количество обнаруженных пятен TLC1 FISH на клетку WT (~ 11) меньше, чем количество молекул TLC1 на клетку (29), как определено биохимическим анализом 8 . Это меньшее число согласуется с предыдущими исследованиями, которые также показали субстехиометрическую эффективность обнаружения с этим протоколом FISH 47 .
Мы определили количество молекул TLC1 в нуклеоплазме, ядрышке и цитоплазме в клетках WT и pop при 24 ° и 30 ° C (рис.9в, г). По сравнению с WT, доля молекул TLC1 в ядрышке в pop клетках как при 24 ° C, так и при 30 ° C существенно не отличалась от WT (фиг. 9d). Однако в обоих штаммах pop в цитоплазме была значительно большая фракция молекул TLC1 по сравнению с клетками WT. Эта разница была значительной как при 24 ° C, так и при 30 ° C, но усугублялась при 30 ° C (фракция цитоплазматического TLC1: 0,32, WT против ~ 0,40, попадает в клеток при 24 ° C; 0,28, WT против ~ 0.52, заселяют клеток при 30 ° C). Мы пришли к выводу, что транзит TLC1 из цитоплазмы обратно в ядро нарушен в клетках pop1 и pop6 .
Despacho 2173/2019, 2019-03-05 — DRE
Despacho n.º 2173/2019
Em cumprimento do disposto no artigo 15.º da Portaria n.º 150/2017, de 3 de maio, alterada pela Portaria n.º 331/2017, de 3 de novembro, homologo os pareceres da Comissão de Avaliação Bipartida da Economia relativos ao Turismo de Portugal, I.P., referentes aos trabalhadores a seguir indicados, nos termos e com os foundation constantes das Atas n.os 12, 14, 16, 17, 18 e 19 e das fichas Individual, documentos que fazem parte integnte do presente processo:
Pareceres Favoráveis à regularização extraordinária
. Абилиу де Хесус Насименто Геррейро (ж)
. Ана Карина Маркес Жардим
. Ана Изабель Маркес Гувейя
. Ана Изабель Траванка Прадо
. Ана Паула Родригес Летрас
.Ана София Паскоа Мигуэн де Альбукерке (ж)
. Андре Филипе Эстевес Мантейгас
. Андре Филипе Родригес Томе
. Bruno Sérgio dos Santos Rocha
. Карла Александра Рибейро Эстевес Серкейра
. Кароль де Соуза Фарту Сантос
. Клаудиа Кристина Маркес Мигель
. Давид Эмануэль де Оливейра Гомеш (ж)
. Décio Miguel dos Santos Henriques
. Diogo Filipe Veloso Gramaço
. Диого Морейра Алвеш Серра Афонсу
.Элиана Мария Рамос Рибейро
. Эмануэль да Силва Фариа (ж)
. Филипа Жуан Родригеш де Оливейра де Лемос Магальяйнс
. Филипе Хосе Морейра (ж)
. Филипе Маркес да Кошта (ж)
. Гонсалу Андре Лигейру де Мело (ж)
. Гонсалу Филипе Кардосу Ромбо
. Уго Мигель Батиста Лопес (ж)
. Изабель Мария Маскареньяш да Фонсека (ж)
. Хайме Мануэль Канарио Кальдейра Барата Дона
. Жоана Сааведра Лоуренсо
.Жуан Филипе да Коста Мачаду
. Жуан Филипе Дуарте Баптиста Кусейро
. Жуан Мигель Дориа Перейра
. Жоау Паулу Магальяйнш (ж)
. Жоау Паулу Родригеш Антунеш (ж)
. Хорхе Филипе Паррейра Фернандес (ж)
. Хосе Мигель Писарро (ж)
. Леонор Сейшас Мейрелеш (ж)
. Lília Alexandra França Monteiro Neves
. Лина Мария Сантос Курадо Серра (ж)
. Луис Мануэль душ Сантуш Тарента (ж)
.Луис Мигель Гонсалвеш Перейра де Фигейреду (ж)
. Луис Педро Ребело де Матос (ж)
. Магда Филипа Родригес Гауденсио Мартинс (ж)
. Мария Араужо Монтейро Казенаве Рибейро
. Мария Эдуарда Алмейда Гарридо Борхес де Фрейтас (ж)
. Мария Инеш Варгас де Соуза Элиаш да Коста
. Мария Мадалена Соарес Оливейра Гомеш Виана и Маркес Коста (ж)
. Мария Мануэла Санчес Алмейда Карвалью (ж)
. Мария Тереза Дуарте Коэльо да Кунья Мартинс де Серпа Барата (ж)
.Marília Carreiras dos Santos
. Марио Александр Морейра де Са (ж)
. Моника Паула Консейсау Кардозу да Силва (ж)
. Нуно Хорхе Кардона Fazenda de Almeida
. Патрисия Жоао Паренте Дуарте (ж)
. Патрисия София Алвеш душ Сантуш Пирес
. Хорхе Пауло Портела Бастос (ж)
. Пауло Хорхе Рамос Печорро (ж)
. Педро Афонсу Фигейредо Вилар
. Рикардо Хорхе Паула душ Празереш Диас (ж)
. Рикардо Мануэль Мораиш душ Сантуш (ж)
.Родриго Хосе Гонсалес де Пассос
. Роса Мария душ Сантуш Буле Маркос (ж)
. Сандра Хоана Лопес де Соуза (ж)
. Сандра Мария Кампос Дуарте Соарес (ж)
. Сандра Мария Муртейро Мартинс
. Sandra Raquel da Conceição Gouveia
. Сара Маргарида Серра Секо
. Susana dos Santos Vasconcelos de Macedo
. Telma Catarina Martins Gonçalves
. Tiago Alexandre Carvalho do Nascimento
. Тьягу Батиста Ромао
.Тьяго Мануэль Бернардино Коста (ж)
. Васко Рикардо Тейшейра Феррейра Алвес (ж)
. Вера Маргарида Рико да Силва Кунья (ж)
. Vítor Gomes de Almeida
. Витор Мануэль да Силва Лоурейро (ж)
. Ив Алекс Жиль Грандмотте-Шоу (f)
(f) Formador
Pareceres desfavoráveis à regularização extraordinária
. Ана Бела де Мелу Диас (ж)
. Ана Изабель Феррейра Баррето де Карвалью Паренте Драммонд Борхес (ж)
.Ана Мария де Мира Батиста (ж)
. Ана Рита Виейра (ж)
. Андрея де Алмейда Пинту Виейра Луис Моутинью (ж)
. Андрея Домингуш Коуту Мадейра (ж)
. Бернарду Маркес Лейте Пейшоту Баррето (ж)
. Карла София Моуран Рибейру Лопес
. Карлос Эдуардо Ногейра Пеликано (ж)
. Клаудиа Александр де Сантос Инасио Деметрио (ж)
. Кристина Мария Сибра Кардозу де Баррос и Васконселос (ж)
. Даниэль Миранда Морейра (ж)
.Элизабет Мария Роман Варгес (ж)
. Гала Гонсалес Перес (ж)
. Хосе Антониу Эстевенс Родригес Эстеван (ж)
. Лучано Силва Роса (ж)
. Марко Пауло Дуарте Рика (ж)
. Мария де Фатима да Силва Батиста Феррейра (ж)
. Мария Жоао Каталао
. Марио Хорхе Кордейро Коррейя (ж)
. Мариса Исабель Мачадо (ж)
. Рафаэль Луис Фернандес Вентура (ж)
. Рикардо Батиста да Мота (ж)
.Роберто Филипе Аренга Хорхе (ж)
. Сандра Кристина Оливейра Ваз Алвес (ж)
. София Мария Энрикес Морейра (ж)
. Сусана Кристина да Силва Кабанелаш (ж)
. Сусана Маргарида Морейра де Маседо (ж)
. Vânia Jamais
(f) Formador
29 de janeiro de 2019. — O Ministro Adjunto e da Economia, Pedro Gramaxo de Carvalho Siza Vieira. — 29 января 2019 г. — O Ministro do Trabalho, Solidariedade e Segurança Social, Жозе Антониу Фонсека Виейра да Силва.- 31 января 2019 г. — A Secretária de Estado da Administração e do Emprego Público, Мария де Фатима де Хесус Фонсека [ao abrigo do disposto na alínea b) do n.º 1 do Despacho de Delegação de Competências n.º 2284 / 2018, de 22 de fevereiro, publicado no Diário da República, 2. série, n.º 48, de 8 de março].
312046752
Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки вашего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.
Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie. - Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере. - Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.
Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Medidor Mecânico de Alta Vazão для Avgas QAV Querosene Fill-Rite 2173 com 500LPM 2 Polegadas
Medidor Mecânico de Alta Vazão для Avgas QAV Querosene Fill-Rite 2173 com 500 л.Com corpo em alumínio, selos em viton. фильтро-де-энтрада для медидора потока, коадр де-альта-конденсатор для альта-велосидад-де-сервис-но-камньяно-дизель, элиминация-де-монтадо-фильтро-вальвула-де-контекст-пара-элиминация-де-рефорасада в движущемся потоке, изменяемый поток заранее установленного прохода. Entregamos para todo Brasil! Confira agora mesmo!
ОПИСАНИЕ:
- Vazão Livre: 500 л / мин
- Entrada e saída: Ø 2 «NPT
- Максимальное давление оперирования: 150 фунтов на кв. Дюйм
- Sistema de Medição: Engrenagens ovais
- песо: 50 кг
- Medidas (мм): 490 (A) x 600 (L) x 480 (C)
.
SAIBA MAIS SOBRE ESSE EQUIPAMENTO:
É um equipamento que mostra a quantidade de fluído que está sendo transferido ou aplicado.
Serve para controlar a quantidade de fluído que está sendo utilizado, evitando desvios, percas e garantindo maior produtividade.
Os medidores são capazes de informar quantidade de volume, vazão e outros parâmetros pré -terminados.
Funciona através da movimentação de engrenagens internas que são interligadas ao painel numerador, esse medidor não needita de bateria ou nenhum tipo de energia, seu funcionamento se dá 100% pela passion de fluídoçãoçensa gão Mostrando a marcação no painel mecânico do medidor.
Irá Precisar se needitar de uma solução para controle de fluído, com a intenção de saber quanto fluído está sendo retirado do reservatório até o ponto de aplicação, teno totalcontrole do estoque a granel.
Controle de estoque, confiabilidade na aplicação, evitar desperdícios e erros. О medidor tem um totalizador do qual contabiliza todo o fluído que passa por ele, dando assim a oportunidade de acompanhar e controlar o consumo do fluído usado e toda a vida útil do medidor.Essa marcação (Totalizador) não pode ser apagada.
TRT-18 14.05.2020 — Стр. 2173 — Судебная практика | Региональный суд по делам Trabalho da 18ª Região
INTIMAÇÃO
Fica V. Sa. intimado para tomar ciência do seguinte documento:
PODER JUDICIÁRIO
JUSTIÇA DO TRABALHO
ATOrd — 0001130-15.2014.5.18.0129
AUTOR: AMANDA ANDRADE DE DEUZA
9000 SEUZA
9000 9000 9000 SEUZA
9000 para tomar ciência de todos os atos executórios praticados pelo Juízo, devendo fornecer os meios needários ao prosseguimento do feito, no prazo de 10 dias, sob pena de remssa ao arquivo provisório pelo prazo de 02 anos nos termos do CL o que fica desde já autorizado em caso de inércia.
vfb
QUIRINOPOLIS / GO, 13 мая 2020 г.
LUDMILLA LUDOVICO EVANGELISTA DA ROCHA
Juiz do Trabalho Substituto
Processo No. JUNIOR
ADVOGADO LENY TEREZINHA DA SILVA (OAB: 22451 / GO)
Intimado (s) / Citado (s):
— JOSE CARDOSO DE VAZ JUNIOR
PODER JUDICIA 9002 HUSTIA
PODER JUDICIA В.Sa. intimado para tomar ciência do seguinte document: EXTINGO O PROCESSO , SEM RESOLUÇÃO DE MÉRITO fulcro o art. 485, IV, e § 3º do Código de Processo Civil, nos termos da foundationação que Integration este dispositivo para todos os fins. Custas pela parte autora no importe de 77,01 реалов (setenta e sete reais e um centavo), teno em vista o valor dado à causa (3,850,70 реалов), das quais fica isenta, por ser beneficiária da gratuidade de justiça .
Transitada em julgado a decisão, arquivem-se os autos com as devidas baixas.
Интайм-сео автор.
LUDMILLA LUDOVICO EVANGELISTA DA ROCHA
Juiz do Trabalho Substituto
Processo Nº AlvJud-0010371-03.2020.5.18.0129
REQUERENTE ANTONIO MARCOS SALDETEN OVERLETE, CA
REQUERENTE ANTONIO MARCOS FERLETE OVERLETE ECONOMICA FEDERAL
Intimado (s) / Citado (s):
— ANTONIO MARCOS FERLETE
PODER JUDICIÁRIO JUSTIÇA DO TRABALHO
INTIMAÇÃO Fica V.Sa. intimado para tomar ciência do seguinte documento: Por todo o exposto, e nos termos da foundationação que Integration este dispositivo para todos os fins, defiro a liberação do limit de R $ 6.220.00 (seis mil duzentos e vinte reais) da conta vinculada do автор ANTONIO MARCOS FERLETE no FGTS, PIS / PASEP 127.34050.16-3.
Рассмотрение очередей, без срока действия искусства. 6º da PORTARIA TRT18 GP / SCR Nº 678/2020, está Suspenso o atendimento presencial ao público externo, não sendo Possível a retirada do alvará físico nesta Secretaria, deverá constar no alvará a desnecessidade de assinatura autenticidade da assinatura eletrônica, caso queira, diretamente nos autos, por meio do site do TRT da 18ª Região (http: // www.trt18.jus.br).
À Secretaria para Expedição imediata do Alvará e envio à CAIXA por e-mail, observando-se as diretrizes da Portaria TRT / 18ª nº 678/2020, com última alteração dada pela Portaria TRT / 18ª nº 752/2020, informando os os dados em seu bojo: CPF do autor (№ 311.